陈建雄，陈艳瑞，张艳敏

（1.乌鲁木齐市种苗场，新疆乌鲁木齐830013；2.中国科学院新疆理化技术研究所，新疆乌鲁木齐830011 3.新疆乌鲁木齐林业局林业处，新疆乌鲁木齐402760）

月季花（Rosa chinansis）又名长春花、月月红、斗雪红等，被评为我国的十大名花之一[1-4]，是近代世界各国广泛应用于园林绿化、庭园栽培和商业生产中的花卉，花大色艳，姿态妩媚婀娜，而且花期长，具有很高的观赏价值，是城市园林绿化的重要花卉之一。月季在我国栽培已有悠久历史，现在新疆也有广泛栽培，但由于新疆气候干燥，传统的月季花的繁殖受到气候因子的制约，同时，由于栽培方法的落后，许多月季花的优良性状在几年当中急剧退化，这使推广和发展月季在城市绿化中的应用受到了限制[5]。

为了快速繁育月季的优良品种，保持品系的优良性状，笔者在月季花组织培养相关文献资料[6-8]的基础上，试图通过离体培养的方法进行月季花组培方面的探索，建立能大量、迅速生产月季花的组培方法，最终实现月季花工厂化育苗的目的，介绍如下。

1 材料与方法

在健康的优良月季母株上，取腋芽的幼茎，剥去腋芽的嫩叶，用自来水进行冲洗，然后在无菌超净工作台上进行消毒，即把幼茎浸入70%酒精中1～2 s，并用无菌水冲洗，再放入0.1%氯化汞（HgCl2）中消毒5 min左右。接着，用无菌水反复冲洗4～5次，再将幼茎切成小段，在酒精灯下操作，接种在已消毒的固体培养基上，诱导腋芽萌发。

月季嫩茎培养选用MS培养基+蔗糖3%+琼脂0.8%，pH调整到5.5～6.0，在MS培养基中分别加入不同浓度的 6-苄基嘌呤（6-BA）、奈乙酸（NAA）、赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）等，配好的培养基经过高温、高压消毒，把盛有培养基的三角瓶放在高压蒸汽灭菌锅内（YXQ601型）保持1.1个大气压30 min，进行灭菌消毒，取出放入准备室待用。

培养条件：温度为18～24℃，每日光照10 h左右，光强为1 500～2 500 lx，将萌发的嫩芽进行继代培养，得到大量的丛生芽，将丛生芽分割成单株，再接种到生根培养基上诱导生根后，移栽至（按1∶3的比例混合）锯末与培养土基质上，移栽幼苗逐步进行练苗14 d后，即可进入苗期的普通栽培管理。

2 结果与分析

2.1 芽的诱导、增殖与生长

将带有腋芽的嫩芽节段，接种于MS+6-BA（1.5～2.0 mg/L）+NAA 0.5～1.0 mg/L+GA 1.0～2.0 mg/L 培养基上，培养2～4 d后都可以使腋芽萌动，10 d后腋芽生成，而且生长速度很快，在愈伤组织周围产生大量的丛生芽。从试验结果观察发现，培养基中的芽生长较快，但不易形成愈伤组织，而且一般看来，具有较大的腋芽，萌动快，芽生长迅速，但不易形成丛生芽，而腋芽较小的，萌动较慢，芽生长缓慢，但易形成丛生芽。另外还发现，较细的嫩茎，一般成苗快，生长良好，而较粗状的老茎，一般成苗慢，芽生长不够理想。由此可见，在试验中外植体的选择很重要。

将上述培养基上生长的嫩芽转入相同培养基中进行继代培养10～15 d后，所有的腋芽开始大量长芽，形成丛生芽，然后将丛生芽切割再分别转入相同的培养基中进行继代培养。

2.2 愈伤组织的形成及扩繁

将带有腋芽的嫩茎接种在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0～2.0 mg/L+GA 1.0～1.5 mg/L培养基中，2个月后，腋芽生长健壮，并形成大量的丛生芽，但苗生长缓慢，且在芽基部形成大量的愈伤组织，将其愈伤组织切割再接种于该培养基中，可进行扩繁增殖，另外，根据观察发现，有一愈伤组织在MS+6-BA 1.5～3.0 mg/L+NAA 4.0～5.0 mg/L+GA 1.5～3.0 mg/L培养基上诱导出苗，其他培养基中的愈伤组织还没有此情况。

2.3 不同培养基对芽生长的影响

将带有月季花腋芽的嫩茎接种在6-BA、NAA、GA等不同浓度的激素培养基中，发现激素浓度对月季花腋芽的生长有很大影响。开始试验时，笔者选择的是前人选用的配方，其浓度为MS+6-BA1mg/L+NAA 0.1 mg/L接种50个腋芽，7 d后腋芽变黑，1个月后陆续死亡。之后又选择了苏州、石家庄等地提供的培养基，但结果均不理想。在此基础上，笔者调整激素浓度与配比，经反复试验，终于取得了较为理想的试验结果，得到适合月季花芽生长的培养基为MS+6-BA 1.5～2.0 mg/L+NAA 0.5～1.0 mg/L+GA 1.0～2.0 mg/L。

2.4 不同培养基对生根的影响

将在增殖培养基上生长的无根月季小苗接于1/2 MS+NAA 0.5～1.0 mg/L，或 MS+6-BA l.5～2.0 mg/L+IAA 1.0～1.5 mg/L的生根培养基上15 d后，绝大多数的月季小苗均可长出根，且地上部分的苗和地下部分的根长势较好。

从试验观察结果来看，将要生根的月季小苗放在黑暗处7 d后，再放入光照处，其生根较快，黑暗能加速诱导生根，在试管苗基部形成了愈伤组织后，一般均生根且生根快。将已形成根原基的试管苗取出，用自来水冲洗干净培养基，直接栽在锯末与土以1∶3体积混合的营养钵中，浇透水，用玻璃罩罩住；初期，注意遮阴保湿，常浇稀释营养水，保持温度在18～20℃，一般均可成活。

2.5 试管苗中花蕾形成

在MS+6-BA 1.5～2.0 mg/L+NAA 0.5～2.0 mg/L分化培养基中，均发现有花蕾形成。试验表明，生长素（IAA或NAA、IBA）与细胞分裂素6-BA以一定的组合对月季芽器官分化产生十分显著的影响，尤其应注意不同品种月季在相同条件因子运用同样激素水平的处理，其芽的增殖和生长情况很不一致，这可能是品种间的遗传基因差异及内源激素水平不同所致。

表1 不同激素配比对芽生长的影响

表2 不同培养基条件下根的生长情况

3 结论与讨论

月季的多芽苗无性系快速繁殖是可以通过诱导愈伤组织出苗，然后进行丛生苗的扩繁和诱导出根的途径来进行大量繁殖，这是一条较快的扩繁途径。这样既降低了成本，又可获取较高的经济效益。月季脱毒苗快速繁殖周期短，40 d左右一代，并在当年应用于生产。综上可知，通过组织培养的方法进行月季花种苗的快速繁殖、保持其优良性状的延续，是成功有效的快繁途径。实现该花卉的工厂化育苗，可为大面积绿化，提高绿化的水平，美化生活，提供优良花卉品种。

[1]薛永卿.月季在城市园林绿化中的应用前景[J].河南林业科技，2005，25（4）：43-44.

[2]刘林幸.月季在园林绿化美化中的应用[J].园艺与种苗，2013（6）：30-32.

[3] 李绍佳.月季遗传背景研究进展[J].园艺与种苗，2012（12）：60-62.

[4]迟东明，岳玲，宋伟，等.树状月季的栽培管理及应用探讨[J].园艺与种苗，2013（5）：25-27.

[5]盖博格 D·L.植物组织培养方法[M].北京：科学出版社，1930.

[6]俞燕芳，管帮富，彭火辉，等.3种不同花色大花月季的组织培养研究[J].江西农业学报，2013，25（10）：33-35.

[7]闫海霞，武鹏，万正林，等.月季衰老机理及保鲜影响因素的研究进展[J].南方农业学报，2013，44（8）：1355-1361.

[8] 刘文萍.月季脱毒苗的快繁技术[J].中国农学通报，1997，13（3）：59-60.