黄建琴，聂少平，张莘莘，黄丹菲，李文娟，谢明勇

（南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌 330047）

灵芝（Ganoderma lucidum）是我国最具有研究价值的著名药用真菌之一，同时也是一种新资源食品［1］。灵芝多糖被认为是灵芝中最有效的生物活性成分之一，研究证实具有很强的生物活性［2］。大量研究表明，灵芝的滋补强身、扶正固本之功效与灵芝多糖的免疫增强活性密切相关［3］。

目前，国内外大量研究表明，灵芝多糖具有明显的免疫调节活性，特别是在灵芝多糖发挥抗肿瘤的研究中，同时伴随着宿主免疫功能的增强，但其具体作用机制尚未完全清楚［4］。在本项目组前期研究基础上，本实验拟通过建立S-180荷瘤小鼠模型，继而收集荷瘤小鼠中免疫细胞，通过给予不同剂量的黑灵芝多糖（PSG-1），研究PSG-1对荷瘤小鼠免疫细胞的免疫调节作用，初步探讨黑灵芝多糖的抗肿瘤机制。

1 材料与方法

1.1 材料 黑灵芝多糖由本实验室制备，纯度大于99.8%。BALB／c清洁级小鼠，♀，体质量（22±2）g，购自南昌大学医学院动物房。S-180细胞株购自中科院上海细胞库。

1.2 方法

1.2.1 动物的分组及造模 取30只小鼠用于建立荷瘤小鼠模型，8只小鼠作为正常对照组。用PBS将S-180细胞悬液浓度调节至每毫升1×106个，每只0.2 m l接种于小鼠右肢腹股沟处。静养约1周后，小鼠右肢处出现肿瘤块，造模成功。

1.2.2 腹腔巨噬细胞及脾细胞的分离纯化 正常小鼠及S-180荷瘤小鼠颈椎脱臼处死，放入碘伏3 min，75%酒精中浸泡3 min脱碘，腹腔注入5 ml预冷的PBS缓冲液，用棉球轻柔腹部1～2 min后，吸取腹腔液于离心管中，重复洗3次，收集以上PBS。……