● 李 妍 刘华一



功能性消化不良中医证型动物模型制备近况

● 李 妍*刘华一

通过对近3年相关文献的整理，笔者从肝郁型(肝胃不和型)，肝郁脾虚型，肝脾气滞型，脾胃虚寒型，脾气虚弱型，胃虚饮停型总结了符合中医证型的功能性消化不良动物模型制备现状。

功能性消化不良 中医证型 动物模型 综述

功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)是消化科门诊的常见病和多发病，严重影响着人们的生活质量。较之西药，中医治疗该病有着明显的优势。近年来，有关该病的动物实验研究也有了较大的进步。通过以“功能性消化不良”、“实验研究”、“鼠”为关键词检索中国知网2010年1月至2013年5月的相关文献计55篇，通过整理发现，文献中明确记录制备中医证型动物模型的有22篇，涉及证型7种：肝郁型(3篇)，肝胃不和型(5篇)，肝郁脾虚型(8篇)，肝脾气滞型(1篇)，脾胃虚寒型(3篇)，脾气虚弱型(1篇)，胃虚饮停型(1篇)。其中肝郁型、肝胃不和型动物模型涉及造模方式1种(夹尾刺激法)；肝郁脾虚型涉及造模方式5种(夹尾刺激法，改良夹尾刺激法，慢性束缚法，慢性束缚加饮食失节加孤养法，慢性束缚加过度疲劳加饮食失节法)；肝脾气滞型涉及1种(慢性应激法(9种刺激因素))；脾气虚弱型涉及1种(不规则喂养法)；脾胃虚寒型涉及造模方式2种(饮食失节加过食肥甘厚味法和食醋灌胃法)；胃虚饮停型涉及1种(稀酸灌胃法)。现将具体方法进行综述，以期对该病的深入研究提供方法和依据。

1 肝郁型

丁宏[1]、白璐[2]、方银玲[3]参考文献[4]用夹尾刺激法制作FD肝郁大鼠模型。方法：每日四次(8:00，11:00，14:00，17:00)用鼠夹夹大鼠尾巴远端1/3处，每次夹尾刺激持续30分钟(如有破损用碘伏涂擦)，连续刺激7天。7天后出现进食量减少，体形渐瘦，溏便，毛发变暗、枯黄、不顺，易怒，常互相嘶咬，并有紧张、焦虑状态，提示造模成功。郭氏的造模方法应用最多，被认为是比较经典的FD模型制备方法。在文献的记录中，弭艳红[5]、胡淑娟[6]、刘松林[7、8]、高帆[9]亦采用该方法建立肝胃不和型FD大鼠模型。

2 肝郁脾虚型

黄雅慧[10]参考郭海军氏方法[4]制作肝郁脾虚型功能性消化不良动物模型。连续刺激8天。于文靖[11]，包海兰[12]、吴艳慧[13]参考文献[4]采用改良夹尾刺激法制造 FD 肝郁脾虚模型。方法：每日用长海绵镊子钳夹大鼠尾巴末端1/3处，以令其尖叫挣扎但不破皮为度( 如有抓伤破皮，则用0.5%碘伏消毒受伤部位，以防感染)，使其暴怒并和其他大鼠厮打，每次持续30分钟，2次/d，连续刺激3周。造模期间，各组大鼠自由进食及饮水。经夹尾刺激后的大鼠，与正常对照组比较，出现进食量减少，体形渐瘦，溏便，毛发变暗、枯黄、不顺，易怒，常互相嘶咬，并有紧张、焦虑状态，提示造模成功。岳利峰，王玲等[14]运用 21d慢性束缚应激法造大鼠肝郁脾虚证模型。方法：将大鼠束缚于特制的束缚架上，每日3h，束缚时间点随机，连续束缚21d。郭建丽，冯玛莉等[15]考虑到现代人压力大、易饮食失节、孤处易抑郁的特点，应用慢性束缚加饮食失节孤养的方法成功创立符合中医证候特征的肝郁脾虚模型。方法：将造模大鼠放入自制的钢丝网笼中，令其身躯及四肢不能自由活动，每笼1只孤养，每天束缚6h，从9：00am-3：00pm。每周给大鼠不定时的禁食2次，造模时间3周。王玉杰[16]、吕瑶[17]采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节的方法制备模型。方法：实验前全部动物进行预游泳，剔除游泳时间少于lOmim，大于20min的大鼠。合格造模大鼠于每天上午8: 00置于束缚盒中限制3h，下午2: 00置于盛有温水(22±1℃)的大塑料桶中游泳l0min。隔日喂食(隔日禁食，隔日足量给食)，连续3周。

3 肝脾气滞型

由于机体对单一应激源刺激易产生耐受性，因此肖政华[18]参考文献[19]运用多种不可预知的刺激方式交替进行，制备肝脾气滞型小鼠模型。小鼠适应性喂养3天，选取多种刺激因素对小鼠进行刺激，包括：①食物剥夺(24h)；②饮水剥夺合并空瓶刺激(12h)；③倒悬(30min)；④束缚(30min)；⑤夹尾(1h)；⑥明暗颠倒(24h)；⑦湿笼饲养(24h)；⑧超声刺激(2 h )；⑨强迫游泳(45°C, 5min)。每天随机选取上述9种刺激中的一种，刺激项目相邻的两天不重复，让动物无法预料剌激的发生，应激处理方法在每日上午08: 30开始更换，这样连续刺激21d，每种刺激方法平均使用2～3次。

4 脾气虚弱型

刘富林等[20]采用不规则喂养的方法，在小鼠胃电节律失常模型[21]基础上，加以超声波噪音刺激。即单日进食，逢双禁食，以打乱正常的饮食规律，自由饮水，并于每日8:00～20:00 将超声波清洗机放置鼠笼附近，每 2 小时噪音干扰 1 次，每次持续约 30分钟，持续 14 天，建立小鼠 FD 模型。

5 脾胃虚寒型

陈苏宁[22]、史业东[23]按文献[24]方法，用4℃食醋给大鼠10L/g灌胃，每日1次，连续10d。大鼠出现，活动减少、倦卧少动、扎堆、拱背、反应迟钝、唇色苍白，捉拿时反抗无力，渐见体型瘦弱，体重下降，便溏，皮毛粗糙稀疏，饮食及饮水量减少，12项中有9项即为造模成功标准。沙兰，吴元祥[25]制备脾胃虚寒模型采用的方法与人类的饮食失节、过食肥甘厚味等多种致病因素相一致。每日灌胃精炼猪油(1ml/100g),同时给以圆白菜喂养，连续造模10d。

6 胃虚饮停型

临床上有类功能性消化不良病人表现为胃液体排空延迟,其临床表现类似于中医痞证中胃虚饮停证的表现。曹峰，傅延龄[26]参考文献[27]的造模方法将大鼠适应性喂养3 天后，在温度为0℃条件下，用浓度为0.5mol/L盐酸(用量按 0.8ml/l00g) 灌胃，每日1次，共造模2 周。

7 小结和展望

建立符合中医证型的动物模型不仅是从事中医药物作用机制研究的基础，而且也是中药新药开发研制的平台，还可用于中药和方剂的药效评价。因此，研究和复制一些符合中医证候特点的动物模型有着十分重要的意义。通过对近3年来功能性消化不良中医证型动物模型制备方法的总结，我们发现目前还存在以下问题：①FD中医分型比较混乱，证型不统一，势必给分型造模带来不便；②合格的中医证型动物模型即要符合中医理论，又要满足FD的诊断标准，严格意义上讲，难度较大；③造模方法相对较为集中，多采用郭海军的夹尾激怒刺激法，如肝郁型和肝胃不和型的模型制作都采用了该方法；④模型制备成功否缺乏客观检测标准；⑤不同制备方法间的优劣比较，研究较少，如肝郁脾虚型造模方法达5种之多，哪种方法好，缺乏进一步的研究。因此需要我们在日后的工作中逐步完善中医证型动物模型的制备，以便更好的进行中医药研究。

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李妍，女，医学博士，主治医师。研究方向：从事脾胃病的临床研究。获市级科技成果奖1项，参与科技部课题1项。

天津中医药研究院附属医院(300120)