■王 蕾 李贤宇

（天津渤海职业技术学院，天津300402）

植物纤维素是植物细胞壁的主要成分，是地球上最丰富、最廉价而又可再生的资源。目前，我国饲料原料资源短缺，因此，开发利用纤维素资源对我国养殖业发展具有重要的意义。即使能够利用纤维素的反刍动物也因内源酶不足极大地降低了饲料的消化率及利用率。因此，高效的纤维素酶的开发成为植物纤维用于饲料的关键。

纤维素酶作为一种安全、高效的生物催化剂已广泛应用到饲料、食品、纺织、生物能源开发等行业，有着非常广阔的应用前景。但是饲料工业中纤维素酶还存在一系列问题，如菌株产量低、生产成本高、酶活力下降迅速等。同时，目前纤维素酶生产菌株多为真菌，相对于细菌来说，存在诸多缺点。因此，本研究从牛瘤胃中筛选出纤维素分解菌，旨在为有效处理高纤维素类物质提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 样品采集

牛瘤胃内容物采自泰安市三合水厂附近养牛场。

1.1.2 培养基

富集培养基：微晶纤维素5.0 g、NaNO31.0 g、Na2HPO4·12H2O 0.65 g、KH2PO40.9 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏0.5 g、水解酪蛋白 0.5 g，蒸馏水1 000 ml，pH值自然，121℃灭菌20 min。

羧甲基纤维素钠刚果红培养基：CMC-Na 10 g、酵母膏1.0 g、KH2PO42.0 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、琼脂15 g、刚果红0.2 g、土豆 10 g、琼脂粉 20 g、蒸馏水1 000 ml，pH值自然，121 ℃灭菌20 min。

牛肉膏蛋白胨斜面培养基：牛肉浸膏3.0 g、胰蛋白胨10 g、NaCl 5.0 g、琼脂粉 20 g、蒸馏水1 000 ml，pH值7.2～7.4，121 ℃灭菌20 min。

发酵培养基：CMC-Na 10 g、胰蛋白胨5 g、酵母膏1 g、蒸馏水1 000 ml，pH值7.0～7.5，121 ℃灭菌20 min。

1.2 实验方法

1.2.1 菌株的分离筛选

菌种的富集培养：在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的羧甲基纤维素钠刚果红培养基之前，先通过选择培养富集纤维素分解菌，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。……