Box-Behnken 设计-效应面法优化水红花子中总黄酮和花旗松素的提取工艺
2014-01-13佟苗苗王添敏王月丹翟延君
佟苗苗, 初 明, 王添敏, 李 娜, 张 慧, 王月丹, 翟延君*
(1. 辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连116600;2. 北京大学医学部基础医学院,北京100191)
水红花子为蓼科植物红蓼Polygonum orientale L. 的干燥成熟果实,始载于《中国药典》1977 年版,具有散血消癥、消积止痛、利水消肿的功效,用于癥瘕痞块、瘿瘤肿痛、食积不消、胃脘胀痛等症[1]。水红花子主要含有花旗松素、槲皮素、山柰酚等黄酮类成分,本课题组在实验研究中发现,总黄酮有较好的抗肿瘤作用,且黄酮中以花旗松素含有量较高。药理研究表明,花旗松素有降血压,保护缺血、缺氧对脑组织的损伤的功效,以及抗炎、抗病毒、抗辐射、抗突变、抗肿瘤等作用[2-4]。因此本实验以水红花子总黄酮、花旗松素提取率的总评归一值为指标[5],采用Box-Behnken 设计实验,优选出最佳的提取条件,为水红花子的开发利用提供理论参考。
1 仪器与材料
1.1 仪器与试剂 Agilent 1260 Infinity 高效液相色谱仪,DAD 检测器(美国Agilent 公司)。岛津UV1750 紫外可见分光光度计(日本岛津公司),电子天平(上海天平仪器厂)。花旗松素对照品(纯度98%,百灵威化学技术有限公司)。乙腈为色谱纯,水为重蒸水,其他皆为分析纯。
1.2 材料 水红花子Polygoni Orientalis Fructus 购于河北安国药材市场,经本校中药鉴定教研室翟延君教授鉴定为蓼科植物红蓼Polygonum Orientale L. 干燥成熟果实。
2 方法与结果
2.1 水红花子总黄酮的测定
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取花旗松素对照品适量,加65%乙醇制成质量浓度为24 μg/mL 的对照品溶液R1 (供测定总黄酮用),加甲醇制成质量浓度为71 μg/mL的对照品溶液R2 (供HPLC 用)。
2.1.2 供试品溶液的制备 精确称取水红花子药材粉末5.0 g,置250 mL 圆底烧瓶中,加65%乙醇100 mL 加热回流60 min,过滤,定容于100 mL 量瓶中。……
