张小慧， 韩向晖 ， 刘 胜， 郭保凤， 王春丽， 韩 伟

(1. 华东理工大学中药现代化工程中心，上海200237;2. 上海中医药大学附属龙华医院中医外科研究所，上海200032)

骨是乳腺癌常见的远处转移部位，超过70%的乳腺癌病人可发生骨转移。乳腺癌骨转移的发病率和死亡率很高，中位生存期仅为2 年［1］。防治骨转移仍是乳腺癌治疗的重点和难点。尽管常规的放、化疗、内分泌治疗和双磷酸盐疗法取得了一定的疗效，但都没有从根本上解决乳腺癌骨转移问题［2］。骨髓微环境中间充质干细胞(bone marrow stem cells，BMSCs)与乳腺癌细胞之间的相互作用是乳腺癌细胞进入并整合到骨髓的重要因素，前速激肽原1 (Preprotachykinin-1，Tac-1)/神 经 激 肽1 受 体 (Neurokinin1 receptor，NK1R)通路是调节这种相互作用的关键途径［3］。临床研究表明，温肾壮骨方配伍经验协定方—乳癌术后方能显著改善患者骨痛症状，减少骨相关事件发生率、延缓溶骨性病变，稳定其生活质量。实验研究也证实温肾壮骨方可以抑制乳腺癌细胞生长、迁移，调节破骨细胞与成骨细胞间分化平衡，阻止骨转移的发展。

本研究通过进一步观察温肾壮骨方对乳腺癌骨转移裸鼠Tac1/NK1R 通路相关分子Tac-1、NK1R、stromal cell derived factor-1α (SDF-1α)、CXCR4 蛋白表达的影响，以期揭示该方干预乳腺癌骨转移的的机制，为中医药防治乳腺癌骨转移提供一定的实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物及细胞株 免疫缺陷BALB/c 裸鼠50只，雌性，体质量18 ～24 g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，动物许可证号:SCXK(沪)2008-0016。

人乳腺癌骨高转移细胞株MDA-MB-231BO 由美国德克萨斯州立大学医学系内分泌所Toshiyuki Yoneda 博士惠赠，在含10 %胎牛血清，50 kU/L青霉素及50 mg/L 链霉素的DMEM 高糖培养基中，37 ℃，5%CO2环境下培养。……