郝 婷，尹营松，李亚洲，刘丽艳，陈四平，赵桂琴

1承德医学院中药研究所/河北省中药研究与开发重点实验室，承德 067000;2 河北师范大学药物研究所，石家庄 050011

橄榄苦苷是一种裂环环烯醚萜苷类化合物，作者从素馨花(Jasminum officinale L.var.grandiflorum)70%乙醇提取物中分离得到。该物质体内外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性明确，在素馨花药材中含量丰富(初步估算超过5%)［1］，易于分离纯化，有望成为新型抗HBV 活性先导化合物。本文建立了测定橄榄苦苷含量的HPLC 方法，并应用该方法对橄榄苦苷在大鼠体内的药代动力学过程进行了研究。

1 材料

1.1 药品与试剂

甲醇(色谱纯，Dikmapure);甲醇(分析纯，天津赛孚试剂厂);甲酸(分析纯，天津市佳兴化工厂);市售纯净水;橄榄苦苷(实验室自制，纯度大于98%);内标物黄芩苷(中国药品生物制品检定所，批号:110715-201016)。

1.2 仪器

Agilent 1200 型高效液相色谱仪(HPLC);HC-2062 高速离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司);梅特勒-托利多AG245 型分析天平(瑞士);KQ-100E 超声清洗器(昆明市超声仪器有限公司)。

1.3 实验动物

SPF 级雄性Wistar 大鼠120 只，体重180～200 g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，合格证:0237506。

2 实验方法

2.1 色谱条件

Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm)色谱柱;流动相:水-甲醇-甲酸(63∶37∶1);检测波长:276 nm;流速:1 mL/min;柱温:30 ℃;进样量:20 μL。

2.2 给药及样品采集

根据预实验结果，确定大鼠灌胃低、中和高剂量分别为100、200 和400 mg/kg。取Wistar 大鼠120只，随机分成低、中、高剂量组，每组40 只给药前12h 禁食，自由饮水。将橄榄苦苷配制为相应浓度的溶液，i.g.给药，给药容积为10 mL/kg，给药后自由饮水，分别于i.g.后5、10、15、30、60、120、240、480 min 采用400 μL 一次性负压采血管(肝素钠抗凝)，腹主动脉取血400 μL(每个时间点5 只)，于2500 rpm 离心15 min，分离血浆，-20 ℃保存。……