王海燕， 邹正渝， 段 亮， 陈 娴， 李 欢， 袁世梅， 何通川， 周 兰

(重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆400016)

骨肉瘤是最常见的原发性恶性肿瘤之一，发病年龄多在15～25岁之间，恶性程度较高，极易出现转移，预后极差，其发病原因和发病机制尚未完全清楚。目前骨肉瘤的治疗采取以手术为主的综合治疗，截肢后3～5年的存活率仅为5% ～20%左右。因此，研究骨肉瘤的发病机制，为临床早期诊断、治疗以及预后提供可靠依据。

S100A6属于S100蛋白家族成员，分子量约为10 kD，能与游离钙离子或者靶蛋白结合后发挥多种生物学作用，如参与细胞的增殖与凋亡、调节酶活性、维持胞内钙稳态，蛋白质的磷酸化等。大量文献报道其在骨肉瘤［1］、胃癌［2］等肿瘤组织中表达异常，其作用机制尚未完全明确。本课题组前期成功制备了有活性的重组人S100A6蛋白(recombinant human S100A6，rhS100A6)，外 源 性 地 加 入 30 mg/L rhS100A6能够显著增强人骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移及侵袭能力，并且明显上调143B细胞中β-catenin的水平，而对143B细胞的凋亡没有明显影响［3］。

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt)信号途径是近年来发现的一条重要的细胞信号转导途径，参与细胞生长、增殖、分化等多个过程，在肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。LY294002和wortmannin是PI3K抑制剂，可以通透细胞特异性阻断PI3K/Akt信号通路，抑制Akt磷酸化。S100A6对143B细胞是否可以通过调节PI3K/Akt信号途径发挥作用，目前尚未报道。本课题联合rhS100A6与PI3K抑制剂LY294002或wortmannin处理143B细胞，旨在探讨PI3K/Akt信号途径在S100A6诱导的143B细胞的增殖和迁移中的作用。

材料和方法

1 细胞与试剂

人骨肉瘤细胞143B由美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室馈赠。……