杨新玲，康少平，程健君，辇晓峰，刘雪晴，贾天军（河北北方学院医学检验学院，河北 张家口 075000）

以动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）为主要病理改变的缺血性脑血管病（ischemic cerebrovascular disease，ICVD）是常见病、多发病，其病因和发病机制较为复杂，近年来感染因素、炎性反应在ICVD中作用得到高度关注［1］。病原体识别分子模式（pathogen recognition molecules pattern，PAMP）与相关模式识别受体（pattern recognition receptors，PRR）是研究的热点，而甘露糖结合凝集素（mannose binding lectin，MBL）是较重要的PRR［2］，且与多种疾病的发病有关。国外研究［3－4］报道：MBL基因突变与心肌梗塞及2型糖尿病患者心血管疾病发病率增加有关。MBL基因多态性与人循环系统中MBL寡聚体含量和功能活性相关，已发现6个对血清MBL水平影响最大的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP）位点。由于MBL启动子区和结构基因多态性，血浆中MBL含量变动很大，电子显微镜观察到MBL二聚体到六聚体等不同的结构聚体形式，人血浆MBL主要以六聚体为主［5］，但在疾病中的研究较少。因此，本研究采用ELISA法和Western blotting法检测我国北方ICVD患者血浆MBL含量及存在形式，同时采用序列特异性引物－多聚酶链反应（SSP－PCR）技术分析MBL基因启动子区多态性，为ICVD的辅助诊断和治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器 Taq DNA聚合酶、dNTP、DNA Marker（大连宝生物公司）；琼脂糖、盐酸胍（Sigma公司，美国）；MBL ELISA试剂盒（北京现代高达生物技术有限责任公司）；鼠抗人的第一抗体（自制单抗）；HRP标记的羊抗鼠第二抗体（南京金思特公司）；预染蛋白 Marker（凯基），DAB显色液（哈尔滨海基生物科技有限公司）等。基因扩增梯度PCR仪、酶标仪（Thermo公司，日本）；凝胶图像分析系统（WD－9403F，北京）；稳压稳流电泳仪（DYY－7C型，北京）；……