鞠爱萍，吴亮，沈进，李礼，姜旭淦，陈盛霞

(江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江212013)

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种广泛分布于世界范围内的重要的人兽共患寄生虫，几乎感染所有的恒温动物，人类普遍易感，据统计全球约有1/3人口感染弓形虫［1］。免疫功能正常人群感染弓形虫后不会出现明显的临床症状，仅表现为轻度流感样症状，但免疫功能降低、缺陷者或胎儿感染后则可引发严重的弓形虫病，从而导致人体各器官出现严重病变，新生儿脑炎、智力障碍，甚至流产、畸胎、死胎［2］。目前弓形虫感染已成为AIDS患者和器官移植者重要的死亡因素之一［3］。弓形虫棒状体蛋白(rhoptry proteins，ROPs)是棒状体分泌的一系列毒力蛋白，是弓形虫入侵宿主的重要作用因子［4－5］。近年来，国内外学者对弓形虫棒状体蛋白的研究取得了一定进展，证明 ROP18是一个毒力关键因子，对于弓形虫入侵宿主细胞及其在细胞内的生存是十分重要的［6］，而国内对ROP18的研究较少。本研究通过原核表达技术成功构建了原核表达载体并获得重组ROP18，为深入研究ROP18的生物学功能及其在入侵中发挥的作用提供了帮助。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞与虫株 HeLa细胞购自中国科学院细胞库。弓形虫RH株由本室液氮冷冻保存。

1.1.2 实验动物 家兔，2.0 kg，雄性，购自江苏省江陵动物实验中心，清洁级环境下饲养。

1.1.3 菌株与质粒 大肠埃希菌(E.coli)DH5α株和Rosetta株及原核表达质粒pET-28a(+)均由本实验室保存，pTG19-T载体购自上海捷瑞生物技术有限公司。

1.1.4 试剂与仪器 总RNA提取试剂……