RNA干扰survivin对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响

2013-10-27唐薇薇

遵义医科大学学报 2013年5期

关键词：检测

唐薇薇，郑洪

(1.遵义医学院病理生理学教研室，贵州遵义 563099；2. 遵义医学院附属医院病理科，贵州遵义 563099)

RNA干扰survivin对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响

唐薇薇1，郑洪2

(1.遵义医学院病理生理学教研室，贵州遵义 563099；2. 遵义医学院附属医院病理科，贵州遵义 563099)

目的探讨RNA干扰survivin基因对卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响。方法实验分3个组：siRNA组，采用脂质体法将靶向survivin siRNA荧光真核表达质粒载体pGPU6-GFP-survivin-shRNA转染卵巢癌HO-8910PM细胞；空白对照组，单纯细胞培养；阴性对照组，用表达与survivin序列无同源性的siRNA片段质粒pGPU6-GFP-NC转染细胞。于转染后48 h和72 h,用PI单染法流式细胞术检测各组HO-8910PM细胞周期的变化以及Western blot检测survivin 蛋白的表达情况。结果PI单染流式细胞仪检测细胞周期结果表明，与空白对照组和阴性对照组相比较，2个时间点siRNA组转染后的G0/G1期细胞比例明显增加，而G2/M期细胞比例均下降(P<0.05)；Western blot结果证实，siRNA组的HO-8910PM细胞survivin蛋白的表达量明显下调。结论导入survivin基因特异性的siRNA可导致卵巢癌HO-8910PM细胞周期阻滞于G0/G1期，细胞增殖受阻，且细胞survivin蛋白表达量下降。

卵巢癌；survivin ；HO-8910PM细胞；细胞周期

恶性肿瘤细胞凋亡和增殖异常的重要原因之一是细胞周期调控异常[1]。史惠蓉等[2]研究发现，卵巢癌组织survivin表达增强并与细胞增殖密切相关。survivin siRNA真核荧光表达质粒载体pGPU6/GFP/Neo/survivin-siRNA是采用DNA重组技术构建的RNA干扰载体，可用于转染肿瘤细胞以阻断survivin基因的表达，而凋亡抑制蛋白survivin主要在恶性肿瘤中高表达，若该基因的表达减弱，则会对肿瘤细胞的增值产生抑制作用，甚至可以促进肿瘤细胞的凋亡[3]。本实验将靶向survivin siRNA真核表达质粒载体转染入卵巢癌HO-8910PM细胞，研究其对该肿瘤细胞周期是否有影响。