何婉媚， 曾 勉， 易 慧， 蒋玉洁， 常敏婵

(中山大学附属第一医院MICU，广东 广州 510080)

Ghrelin对脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞及肺组织iNOS表达的影响*

何婉媚， 曾 勉△， 易 慧， 蒋玉洁， 常敏婵

(中山大学附属第一医院MICU，广东 广州 510080)

目的观察ghrelin对脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞及肺组织诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的影响。方法SD雄性大鼠分为假手术组、脓毒症组及ghrelin治疗组，前2组各设术后6 h、12 h和20 h亚组。通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)建立脓毒症模型，ghrelin治疗组于术后3 h及15 h腹腔注射ghrelin，术后20 h取材。各组按术后既定时间行支气管肺泡灌洗收集肺泡巨噬细胞，RT-PCR检测肺泡巨噬细胞中iNOS mRNA的表达水平。另一部分大鼠则在术后20 h采集右肺，行肺病理学检查及Western blotting检测肺组织iNOS蛋白表达。结果脓毒症组在CLP术后6 h、12 h和20 h肺泡巨噬细胞iNOS mRNA的表达水平分别为1.33±0.05、1.44±0.08和1.57±0.11，均高于假手术组(P<0.05)，并不随时间延长而升高；但在术后20 h却低于ghrelin治疗组(2.27±0.37；P<0.05)。Ghrelin治疗组CLP术后20 h肺组织iNOS蛋白表达水平(0.87± 0.03)低于脓毒症组(P<0.05)。Ghrelin治疗组肺组织病理学评分(5.83±0.477)较脓毒症组(7.83±0.75)低，2组均高于假手术组(P<0.05)。结论CLP术后6～20 h，大鼠肺泡巨噬细胞iNOS mRNA的表达水平升高，但无时间依赖性。Ghrelin对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞iNOS mRNA表达起上调作用，而对肺组织iNOS蛋白表达起抑制作用，减轻肺损伤程度。

Ghrelin； 脓毒症； 肺损伤； 一氧化氮合酶； 肺泡巨噬细胞

生长激素释放肽ghrelin是1999年在大鼠体内发现的一种由28个氨基酸组成的内源性的生长激素释放激素受体的配体。人们发现外源性给予ghrelin可使急性肺损伤(acute lung injury, ALI)动物的肺损伤程度和死亡率下降[1-2]，这与ghrelin抑制NF-κB活化的作用有关[2]。NF-κB调控包括诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在内的多种物质的转录，激活NF-κB可增加iNOS mRNA的表达[3]。Chen等[1]在含肺泡巨噬细胞的培养皿中加入脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)和ghrelin后发现，培养液中的一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)活性提高。iNOS与ALI的发生发展关系密切。敲除iNOS基因的小鼠在注射LPS后，肺损伤的程度较野生型小鼠显著减轻[4]。此外，肺泡巨噬细胞等炎症细胞内iNOS的活性可影响脓毒症肺部微血管的通透性与氧化应激的程度[5]。……