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自拟康肾口服液对水负荷大鼠模型的影响

2013-10-09易伟国赵京生张正臣

实用医药杂志 2013年5期
关键词:尿毒尿量口服液

易伟国,赵京生,张正臣

肾脏病多数属“水肿、腰痛”等病范畴。病因多端,是由于风邪外袭,或饮食所伤,或劳逸失衡,久居湿地等所致。不论外感或内伤,均为肺脾肾三脏水液代谢失常所致,尤以脾肾所伤为主,治疗宜益气温阳,固本涩精,活血通络。康肾口服液方中以人参、黄芪为君药,两药为辛、温之品,入脾肾二经,补肾健脾,固本涩精;山药、白术等健脾生精化源为臣药,重在补后天之本,以助先天之本;淫羊藿、芡实、金樱子温阳固本升清,涩精,以不致精微外泄;地龙、红花化瘀血通经络,共为佐药,使脾肾之络气通畅,又能升轻而降浊;甘草调和诸药,又能缓和诸药阳热过甚,兼有气血双补之功;以上诸药密切配合,重点旨在补肾健脾,兼而活血,使正气自复,瘀血自除,肾病得愈。为探究疗效原理笔者对康肾口服液对水负荷大鼠模型的影响进行了实验研究。

1 材料与方法

1.1 实验药品 康肾口服液,由人参、生黄芪、白术、茯苓、淫羊藿、怀山药、地龙、红花、金樱子、芡实、甘草等组成,具有益气温阳,固本涩精,活血通络之功,用于慢性肾炎、肾病综合征、阳痿早泄等作用,由解放军第371医院制剂室提供,批号20110425;尿毒清颗粒,康辰药业(内蒙古)有限责任公司生产,批号20110114;呋塞米,天津力生制药股份有限公司生产,批号1101008;氯化钠注射液,河南太龙药业股份有限公司生产,批号11082465;血清钾测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20120104;氯化物测定试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20120104;钠测定试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20120104。

1.2 实验动物 Wistar大鼠,清洁级,河北省动物实验中心提供(合格证号1112130)。

1.3 实验仪器 UV-2000紫外可见分光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司;TGL-16G台式离心机,上海安亭科学仪器厂;可调式移液器,上海雷勃分析仪器有限公司。

1.4 实验方法 取清洁级体重180~200 g大鼠,Wistar,雄性;实验前先筛选大鼠泌尿作用,大鼠禁食不禁水12 h,灌服25 ml/kg的生理盐水,2 h内收集的尿量达到所灌入量的40%以上的大鼠可用于利尿实验。取筛选合格的大鼠72只,随机分为6组,12只/组,分别灌服大、中、小剂量康肾口服液(20 ml原药液/kg、10 ml原药液/kg、5 ml原药液/kg,原药液、生理盐水稀释1倍、生理盐水稀释2倍,2 ml/100 g)、尿毒清颗粒混悬液(4.2 g/kg,用生理盐水配成0.21 g/ml,2 ml/100 g)、呋塞米片混悬液 (6.6 mg/kg,用生理盐水配成 0.33 mg/ml,2 ml/100 g)和同体积的生理盐水(2 ml/100 g);给药 1次/d,连续给药7 d。于第6天晚上大鼠禁食不禁水,第7天禁食不禁水16 h,给各组大鼠灌服生理盐水25 ml/kg,并轻压下腹部使膀胱排空;30 min后各组灌服相应药物,立即将大鼠放入代谢笼内(每笼1只),量计尿量1次/h,共计5 h,收集给药后 5 h 总尿量,测尿液中 Na+、K+、Cl-的浓度。

1.5 含量测定

1.5.1 血清K+的测定 (比浊法) 样本前处理:取血清0.1 ml加蛋白沉淀剂0.9 ml,3500 r/min离心5 min,取上清0.5 ml,进行钾的测定。定值血清必须同样进行蛋白沉淀。

计算:血清钾含量(mmol/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×标准浓度×样本测试前稀释倍数(10)

1.5.2 钠的测定 计算公式:C样=A样/A标×C标

1.5.3 氯化物的测定 (手工试剂) 计算公式:氯离子含量(mmol/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100 mmol/L

与生理盐水组比,在第1小时,小剂量康肾口服液组和呋塞米片组可显著增加大鼠尿液量 (P<0.01);在第2小时,各给药组均有增加大鼠尿液量的趋势;在第3小时,大剂量康肾口服液组可显著增加大鼠尿液量(P<0.01),中剂量康肾口服液组和尿毒清颗粒组可明显增加大鼠尿液量 (P<0.05);在第3、4小时,各给药组增加大鼠尿液量不明显;中、小剂量康肾口服液组、尿毒清颗粒组和呋塞米片组均可显著增加大鼠5 h总尿量(P<0.01),大剂量康肾口服液组仅有增加大鼠5 h总尿量的趋势 (P>0.05);以中、小剂量康肾口服液组对水负荷大鼠模型5 h尿量增加作用为好。见表1。

与生理盐水组比,大、中、小剂量康肾口服液组、尿毒清颗粒组和呋塞米片组均可显著增加尿液中尿氯离子含量(P<0.01);大、中剂量康肾口服液组、尿毒清颗粒组和呋塞米片组均可显著增加尿液中尿钠离子含量(P<0.01),小剂量康肾口服液组仅有增加尿液中尿钠离子含量的趋势(P>0.05);尿毒清颗粒组可显著增加尿液中尿钾离子含量 (P<0.01),大、中、小剂量康肾口服液组和呋塞米片组仅有增加尿液中钾离子含量的趋势(P>0.05)。见表2。

3 讨 论

康肾口服液对水负荷大鼠模型的影响中与对照组比,康肾口服液各组和呋塞米片组可显著增加大鼠尿液量(P<0.01);康肾口服液和尿毒清颗粒可明显增加大鼠尿液量(P<0.05);康肾口服液、尿毒清颗粒和呋塞米片均可显著增加大鼠5 h总尿量 (P<0.01),但以中、小剂量康肾口服液组对水负荷大鼠模型5 h尿量增加作用为好。康肾口服液、尿毒清颗粒和呋塞米片均可显著增加尿液中尿氯离子含量 (P<0.01);均可显著增加尿液中尿钠离子含量(P<0.01);尿毒清颗粒可显著增加尿液中尿钾离子含量(P<0.01),康肾口服液和呋塞米片仅有增加尿液中尿钾离子含量的趋势(P>0.05)。实验提示:康肾口服液有较好的利尿作用。

表1 各组大鼠各时点尿量(±s,ml)

表1 各组大鼠各时点尿量(±s,ml)

注:与生理盐水组比,*P<0.05,#P<0.01

组别 n生理盐水组 12呋塞米片组 12尿毒清颗粒组 12大剂量康肾口服液组 12中剂量康肾口服液组 12小剂量康肾口服液组 12剂量(ml原药液/kg) 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 5 h总尿量2.3±1.3 0.9±0.4 0.6±0.3 0.3±0.3 0.3±0.3 4.3±1.2 6.6 mg 5.3±1.7# 1.2±0.5 0.4±0.2 0.2±0.2 0.2±0.3 7.3±1.5#4.2 g 1.8±1.5 1.6±0.8 1.0±0.4* 0.3±0.4 0.4±0.2 5.2±1.1#20 1.3±1.4 1.3±0.6 1.2±0.6# 0.4±0.4 0.4±0.4 4.6±1.6 10 2.0±0.7 1.6±0.8 0.9±0.4* 0.5±0.4 0.3±0.3 5.2±0.9#5 2.9±0.7# 1.1±0.8 0.7±0.5 0.4±0.3 0.3±0.3 5.3±1.2#

表2 各组大鼠尿中 Na+、K+、Cl-含量(±s,mmol/L)

表2 各组大鼠尿中 Na+、K+、Cl-含量(±s,mmol/L)

注:与生理盐水组比,*P<0.05,#P<0.01

组别 n生理盐水组 12呋塞米片组 12尿毒清颗粒组 12大剂量康肾口服液组 12中剂量康肾口服液组 12小剂量康肾口服液组 12剂量 尿Cl- 尿Na+ 尿K+37.40±14.07 60.00±5.78 32.76±6.65 6.6 mg 62.33±13.90# 73.20±9.20# 33.24±5.59 4.2 g 68.93±16.52# 69.53±5.03# 40.69±8.55*20 ml原药液/kg 73.62±16.99# 81.73±13.34# 36.51±7.27 10 ml原药液/kg 67.97±18.76# 70.86±11.37# 38.43±6.60 5 ml原药液/kg 57.24±19.13# 67.57±11.84 35.01±6.05

志谢 本实验在河南中医学院苗明三教授指导下完成,特此致谢

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