DFMG对LPC诱导的人脐静脉内皮细胞的CD40/CD40L相互作用及E-选择素的释放的影响

2013-10-07杨慧琼戴哲娟曹建国符晓华

湖南师范大学学报(医学版) 2013年1期

关键词：实验

杨慧琼，戴哲娟，张婧，曹建国，符晓华

（湖南师范大学医学院，湖南长沙 410013）

动脉粥样硬化是冠心病、脑梗死等心脑血管疾病的重要病理基础。血管内皮细胞是连续被覆在全身血管内膜的一层表面光滑的扁平细胞，直接和血液接触，不仅具有生理屏障作用，而且具有调节动脉血管舒缩、凝血系统平衡、血小板聚集、单核细胞聚集和促进新生血管生长的功能[1-2]。血管内皮的损害是动脉粥样硬化发生发展的始动因素[3]。近年来发现,CD40/CD40L广泛存在于动脉粥样硬化(AS)斑块的各种细胞中,其相互作用显著影响AS相关细胞的功能,并且与斑块的发生发展密切相关[4]。因此，保护血管内皮细胞，拮抗内皮细胞凋亡是防治心血管疾病特别是抗动脉粥样硬化的前沿研究领域之一。

7-二氟甲氧基-5、4'-二甲氧基金雀异黄素（7-difluoromethoxy-5，4'-dimethoxygenistein，DFMG）是我们自主设计、合成和筛选得到的一种较先导化合物GEN具有更强的保护血管内皮过氧化氢应激损伤作用的活性新化学实体[5]。本文旨在DFMG拮抗LPC诱导的HUVE-12细胞凋亡是否与抑制CD40/CD40L的表达及E-选择素的释放的有关。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

DFMG由本实验室参照文献[4]方法合成，纯度＞99%，分子式C18H14O5F2，分子量 348，性状为淡黄色晶体粉末。GEN （美国 Sigma公司）、LPC （美国Sigma公司）、AnnexinⅤ-FITC/PI双染试剂盒 (美国Roche 公司)、FITC anti-human CD40(美国 Biolegend公司)、FITC anti-human CD40L(美国 Biolegend 公司)、PE Mouse IgG1,κ Isotype Ctrl Antibody(美国 Biolegend 公司)、Human endothelium-selectin Kit(美国RayBio公司)购自湖南科泰生物技术有限公司（中国长沙）。