袁 鹰 ，张庭瑞 ，董明芝 ，赵 波 ，黄 婷

(1.西安正大制药有限公司，陕西 西安 710043;2.宁夏回族自治区固原市原州区药材公司，宁夏 固原 756000)

可待敏缓释胶囊的主要成分为磷酸可待因和马来酸氯苯那敏，临床上主要用于暂时缓解一般性感冒或吸入刺激物引发的咳嗽，以及由于干热、其他上呼吸道过敏或过敏性鼻炎导致的鼻塞、喷嚏、鼻或喉咙搔痒、眼睛不适等症状。对缓释制剂进行释放度测定是控制其质量的重要指标之一。笔者参考文献[1－2]，建立了反相高效液相色谱法测定可待敏缓释胶囊的释放度，现报道如下。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪，包括Shimadzu LC－10 ATVP泵，Shimadzu SPD－10AVP紫外检测器;AL－204型电子天平(梅特勒公司);RC－806型智能溶出仪。磷酸可待因对照品(中国药品生物制品检定所，批号为041112，含量100%);马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物制品检定所，批号为030415，含量100%);可待敏缓释胶囊(自制，批号为 20040601，20040602，20040603);水为纯净水，甲醇为色谱纯，离子对试剂己烷磺酸钠(IPR－B6，天津市化学试剂二厂)，色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Diamonsil C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:0.05 mol/L磷酸二氢钾，加入0.01%的己烷磺酸钠溶液(IPRB6)和0.5%三乙胺，用磷酸调 pH至6.0，与甲醇以(50∶55)的比例配成流动相并调节 pH 至 7.0～7.5;流速:1.0 mL/min;进样量:20 μL;检测波长 220 nm;柱温:室温。

2.2 溶液制备

取磷酸可待因和马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1 mL约含磷酸可待因20 μg、马来酸氯苯那敏4 μg的溶液，摇匀，即得对照品溶液。取供试品20粒，精密称定，取内容物混合均匀，研细，精密称取适量(约相当于磷酸可待因20 mg)，置100 mL容量瓶中，加水适量，超声处理20 min，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液用水稀释制成每1 mL约含磷酸可待因20 μg的溶液，摇匀，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

干扰试验:将空白微丸(以成品的生产工艺制成不含药物成分的包衣微丸)按处方量装入3号胶囊中，分别取空白胶囊和可待敏缓释胶囊各1粒，分别置溶出杯内，按照样品释放度试验条件进行试验，于12 h取样，按照释放度检测方法进行检验。结果空白微丸在磷酸可待因和马来酸氯苯那敏主峰保留时间处无色谱峰，不影响主药成分释放度的测定，表明在此条件下无背景干扰。高效液相色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:根据处方比例，将两种主药成分配制成一系列不同质量浓度的混合对照品溶液，依次进行液相色谱分析，以峰面积 A为纵坐标、质量浓度 C(μg/mL)为横坐标进行线性回归。磷酸可待因回归方程为 A=44 139 C，r=0.999 9;马来酸氯苯那敏的回归方程为 A=32 978 C－16 017，r=0.999 8。结果表明，磷酸可待因质量浓度在0～30.0 μg/mL范围内，马来酸氯苯那敏质量浓度在2.814～5.226 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:取供试品水溶液(配制成每毫升约含磷酸可待因20 μg、马来酸氯苯那敏4 μg的溶液)，于室温下自然放置，分别于 0，1，2，4，6，8 h 时进样测定(n=6)。结果可待因峰面积的RSD为0.2%，马来酸氯苯那敏峰面积的 RSD为0.3%。

重复性试验:取批号为20040601样品6份，在拟订的色谱条件下进行测定。结果磷酸可待因、马来酸氯苯那敏含量的 RSD分别为0.26%和0.39%(n=6)，表明方法重现性好。

回收率试验:按处方比例，取两种主药成分及各种辅料配制成样品后，测两种组分的回收率。结果磷酸可待因和马来酸氯苯那敏两种成分的回收率分别为99.7%和100.6%，RSD分别为0.17%和0.28%(n=9)，表明分析方法准确可靠。

重现性与均一性试验:考察至少3批(每批6粒产品)样品的批与批之间体外药物释放度的重现性，并考察同批产品(即1批6粒)的体外药物释放度取样时间点的均一性。结果见图2。可见，3批中试样品的溶出曲线重现性很好，表明方法的重现性与均一性很好。

图2 3批中试样品体外药物释放曲线

2.4 样品释放度检测

取本品，照2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩD第一法中释放度测定法，采用2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩC第二法中溶出度测定法的装置，以水900 mL为释放介质，转速为100 r/min，依法操作，经 1，4，8 h，分别取溶液 5 mL 滤过，并即时在操作容器中补充释放介质5 mL。分别精密量取续滤液20 μL，注入液相色谱仪，按照上述色谱条件测定，记录色谱图;另取磷酸可待因、马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1 mL中约含磷酸可待因20 μg、马来酸氯苯那敏4 μg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积分别计算每粒在不同时间的释放量。磷酸可待因的限度为本品每粒在1，4，8 h的释放量，分别为标示量的10% ～35%，55% ～80%，75%;马来酸氯苯那敏的限度为本品每粒在1 h的释放量为标示量的80%，符合规定。结果见表2。

表2 样品体外释放度测定结果(n=6)

3 讨论

分别取两组分对照品溶液，用紫外分光光度计于190～280 nm波长范围内进行紫外扫描，两者在220 nm波长处均有较大的吸收，因此确定检测波长为220 nm。

2010年版《中国药典(二部)》规定，以去空气的新鲜水为最佳的释放溶剂，释放溶剂的体积应符合漏槽条件。参照2010年版《中国药典(二部)》磷酸可待因及马来酸氯苯那敏的质量标准，采用可待敏缓释胶囊体外药物释放度试验的释放介质为水900 mL。

[1]南 楠，陈 华，朱霁虹.HPLC法测定万辉化痰止咳露中磷酸磷酸可待因、盐酸麻黄碱和马来酸马来酸氯苯那敏的含量[J].药物分析杂志，2000，20(1):7 －9.

[2]李小清.高效液相色谱法测定复方磷酸可待因溶液中的扑尔敏含量[J].中国药业，2001，10(1):29 －30.