谭本仁 徐晓梅 罗 君 郭基燕 许卫关

1.汕头大学医学院附属粤北人民医院，广东韶关 512026；2.广东省韶关市食品药品检验所，广东韶关 512028

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）的感染会导致急慢性乙型肝炎的发生，是引起肝硬化、肝细胞癌的重要因素之一，每年约有50 万人死于由HBV 感染引起的急性肝炎、肝硬化及肝癌等疾病[1-2]，目前临床尚无治疗乙肝的特效药物。复方叶下珠滴丸是由叶下珠、半边莲、半枝莲、鸡骨草、茵陈、丹参、柴胡等十六味草药经科学提取工艺精制而成的滴丸，具有疏肝解郁，益气健脾，抗乙肝病毒，改善肝功能、调节免疫机能等功效，能防治急慢性肝炎、重症肝炎、肝硬化、肝癌等疾病。本实验采用酶联免疫吸附检测（ELISA）技术和荧光定量（PCR）方法，分析复方叶下珠滴丸对HepG2.2.15 细胞培养液及HBsAg 阳性人血清培养液中HBsAg、HBeAg 及HBV DNA 含量的影响， 观察复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒的作用。

1 仪器与材料

1.1 试药与试剂

试药：采用复方叶下珠滴丸处方中十六味草药以水提醇沉法（加水十倍，煎煮1 h，醇沉浓度为60%）制成的流浸膏（每1 mL 含原生药材1 g）为试药。

试剂：HBsAg、HBeAg 诊断试剂盒 （新波生物技术公司）， 靶细胞选择HepG2.2.15 细胞 （HBV 全基因传染的HepG2 细胞），HBV DNA 荧光定量PCR 试剂盒（上海复兴生物技术公司）。

1.2 仪器

EFFICUTA2710 免疫分析仪和全自动样本前处理系统，Roche Light Cycler480Ⅱ实时荧光定量PCR 系统，37℃5%CO2培养箱（Phermo）。

1.3 统计学方法

采用SPSS v19.0统计软件进行处理，计量资料数据以均数±标准差（±s）表示，比较采用t 检验，计数资料采用百分率表示，组间对比采用χ2检验。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 方法与结果

2.1 细胞培养……

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