王 艳 Amit K Mitra Jatinder K Lamba 姬怀雪

1.徐州医学院附属医院药剂科，江苏徐州 221006；2.美国明尼苏达大学药学院，美国明尼苏达 55108

急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）是一组高度异质性的恶性血液肿瘤。阿糖胞苷是治疗AML最重要的一线化疗药物，能提高患者生存率[1-2]。然而，阿糖胞苷耐药的产生一直是影响AML患者生存率的瓶颈[2]。因此，鉴定影响阿糖胞苷耐药性的关键基因的变异，对于避免阿糖胞苷耐药性的发生有重要作用。异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydrogenase1，IDH1）是近期发现的一种NADP依赖型的异柠檬酸脱氢酶[3]。研究发现，IDH1基因突变致与急性白血病的发生与不良预后密切相关[4]。然而，IDH1对非洲人群急性白血病患者阿糖胞苷耐药性的影响目前并不清楚。本研究旨在探讨IDH1对非洲人群AML患者阿糖胞苷耐药性的影响，为提高该人群AML患者阿糖胞苷的疗效，降低不良反应奠定基础。

1 材料和方法

1.1 细胞培养

应用来自国际人类基因组计划60个非洲人（YRI）EBV病毒转化的淋巴母细胞系（lymphoblastoid cell line，LCL）。上述细胞株购自美国Coriell医学研究所。将上述细胞株置于含有L-谷氨酰胺（Lonza Walkersville，Inc.，Walkersville，MD）的 RPMI 1640 培养基中，加15%热灭活血清37℃，5%CO2条件下培养[5]。

1.2 阿糖胞苷的细胞耐药性检测

阿糖胞苷耐药性检测参照文献[6]方法进行。予不同浓度的阿糖胞苷（1，5，40，80 μmol/L）加入细胞中共培养72 h后，应用alamar Blue试剂盒（Biosource international，Camarillo，CA）参照制造商说明书检测细胞存活曲线、细胞增殖和细胞毒性。梯形法计算阿糖胞苷曲线下面积（AUC）判断该药的耐药性（以更高的AUC表示），AUC进行Log2转换后统计分析[6]。

1.3 IDH1基因多态性检测

DNA样本来自HapMap非洲人群的LCL细胞株。参照文献[7]，针对IDH1突变热点区域设计引物，由明尼苏达大学生物医学基因组学中心合成。……