蛋白印迹法检测梅毒IgG抗体
2013-09-13邹宇斌林燕霞郭健英
中国卫生产业 2013年20期
关键词:检测
邹宇斌 林燕霞 郭健英 梁 平
1.广东东莞市沙田医院皮肤科,广东东莞 523980;2.广东东莞市沙田医院检验科,广东东莞 523980;3.广东东莞市康华医院皮肤科,广东东莞 523000
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性传播疾病。不论出现假阳性还是假阴性结果,对患者本人及其亲友都有重大影响,也容易引起医疗纠纷,因此对结果的报告必须慎重。国内实验室诊断主要依赖血清学方法,一般为检测梅毒非特异性抗体的TRUST和检测梅毒特异性抗体的TPPA联合筛选。WB是近二十余年新发展起来的一种先进检测技术。本文以TRUST、TPPA作为对照,对蛋白印迹法检测梅毒IgG抗体的若干问题作一探讨。
1 材料与方法
1.1 血清来源
临床确诊的24例梅毒孕妇分娩后,取新生儿的静脉血,共24份。
1.2 试剂和方法
取母亲静脉血进行TRUST和TPPA试验;取新生儿静脉血进行TRUST、TPPA和TP-IgG-WB试验。试剂来源:①TRUST试剂:由上海荣盛生物技术有限公司生产;②TPPA试剂:由日本富士瑞必欧株式会社生产:③TP-IgG-WB试剂盒:由德国欧蒙医学实验室有限公司生产。试验方法:①TRUST试验方法:分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中,取待检血清50 uL置于纸卡的另一圆圈中,然后用专用滴管垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中,按每分钟100转,摇动8 min,肉眼观察。②TPPA试验方法:用微量滴管将血清稀释液滴入反应板第1孔中,共计100 μL,从第2孔至第4孔各滴25 μL。用微量移液管取样品25 μL至第1孔中。然后从第1孔倍比稀释至第4孔。用试剂盒中提供的滴管在第3孔中滴入25 μL未致敏颗粒,在第4孔中滴入25 μL致敏颗粒。……
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