杨菁菁， 蒋红云， 张 兰， 沈斌斌

（1.华南农业大学资源与环境学院，昆虫生态研究室，广州 510642；2.中国农业科学院植物保护研究所，农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室，北京 100193）

生物测定作为一种手段，广泛应用于新农药的筛选、毒力测定与药效试验及抗药性检测等方面。毒力测定方法包括药膜法、浸渍法、喷雾法等，这些方法都是利用活体昆虫进行生物测定，随着农药创制的发展，传统的生物测定技术的缺点越来越明显。特别是在研究天然产物中的杀虫活性物质时，由于其含量较低，又有协同、拮抗效应，致使工作量加大，成本较高，周期长，已不能满足批量新化合物活性筛选的需要，因此，需要一些新的筛选方法来适应新农药创制的迅速发展［1］。基于细胞水平的试验，以微孔板为试验工具，通过灵敏准确的检测仪器收集数据，具有快速、准确、灵敏等优点，为化合物的大规模生物活性测定提供了一种有效的方法［2－3］。

利用离体昆虫细胞代替活体进行活性测定是一种直接反映化合物毒性作用的检测方法。本试验研究了几种植物源活性物质对甜菜夜蛾［Spodoptera exigua（Hübner）］IOZCAS－SPEX－Ⅱ和草地贪夜蛾［Spodoptera frugiperda （Smith）］Sf 9细胞的增殖抑制活性，旨在从细胞水平上探讨几种植物源活性物质的杀虫活性及机制。

1 材料与方法

1.1 材料

供试细胞：甜菜夜蛾中肠脂肪体细胞IOZCASSPEX－Ⅱ和草地贪夜蛾胚胎细胞Sf 9，本实验室培养（中国科学院动物研究所赠送）。IOZCAS－SPEX－Ⅱ细胞培养于 Hink’s TNM （Sigma，USA），Sf 9细胞培养于Sf－900TMII SFM （Invitrogen，USA）。培养基添加10% 胎牛血清（Invitrogen，USA），100U青霉素和100U链霉素。……