郭立新， 谭 毅， 刘永丰， 邓丛良， 段维军， 许邹亮

（1.北仑出入境检验检疫局，宁波 315800；2.北京出入境检验检疫局，北京 101312；3.宁波出入境检验检疫局，宁波 315012；4.北京蓝谱生物科技有限公司，北京 100086）

南芥菜花叶病毒（Arabis mosaic virus，ArMV）是豇豆花叶病毒科（Comoviridae）线虫传多面体病毒属（Nepovirus）成员。其寄主范围广泛，可侵染174属215种植物，引起最常见症状是叶片斑驳和脱落、植株矮化、严重畸形、耳突［1］。ArMV主要经汁液摩擦和介体线虫传播，传播介体主要为异尾剑线虫（Xiphinema diversicaudatum），ArMV 也可通过种子、鳞球茎、块茎和苗木等无性繁殖材料远距离传播［1－2］。该病毒主要分布在荷兰、比利时等欧洲国家和美国、加拿大、澳大利亚、新西兰、南非、日本，我国尚未有报道［1，3］。

目前，ArMV的检测主要采用生物学［4］、电子显微镜［4］、血清学［1，5－6］、RT－PCR［1－2，5－6］、实时荧光 RTPCR方法［1，7］，而未见有环介导等温扩增（loop－mediated isothermal amplification，LAMP）技术检测的报道。LAMP技术是Notomi等［8］2000年首先提出来的一种新的核酸扩增技术，该技术依赖于能够识别靶序列上6个特异区域的引物和一个具有链置换特性的 DNA 聚合酶（Bst DNA polymerase），在等温条件下高效扩增靶基因，灵敏度和特异性高［8］。该方 法 已 应 用 于 病 毒［9－12］、类 病 毒［13］、细 菌［14］、真菌［15］及转基因［16］的检测。本研究根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计特异性引物，成功建立了ArMV的RT－LAMP检测体系，用于ArMV的快速检测。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源

1份南芥菜花叶病毒阳性质控物，购自美国Agdia公司，简写为Ar－A；另1份南芥菜花叶病毒阳性质控物，购自德国DSMZ公司，简写为Ar－D；1份受ArMV侵染的唐菖蒲叶片，由北京出入境检验检疫局植物检疫实验室提供，简写为YP。……