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黄粉虫脱脂粉对小鼠血糖和血脂水平的影响

2013-09-05李汉臣赵希艳吉志新杨晓宽缴宝丰

食品研究与开发 2013年1期
关键词:黄粉虫血糖值血脂

李汉臣,赵希艳,吉志新,杨晓宽,缴宝丰

(1.河北科技师范学院,河北秦皇岛 066600;2.秦皇岛粮丰贸易有限公司,河北秦皇岛 066000)

关于黄粉虫(Tenebrio molitorLinneeus)的营养成分和营养价值已有诸多报道。黄粉虫的饲养也具有比较成熟的技术,适合进行工厂化生产[1-2],是一种极具开发潜力的昆虫资源。李汉臣等就黄粉虫及其成分对小鼠的生长发育、学习记忆能力、抗疲劳能力等方面的营养保健作用做了初步报道[3-4]。近年来,高血糖和高脂血症的发病率逐年升高,辅助降血糖和降血脂保健食品的开发也受到广泛关注。因此,进一步研究了不同剂量的黄粉虫脱脂粉对小鼠血糖和血脂水平的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 黄粉虫及其脱脂粉

黄粉虫由秦皇岛粮丰贸易有限公司养殖并提供,微波干燥后经超临界二氧化碳流体萃取除去油脂,剩余物为脱脂粉,粉碎40目过筛备用。

1.1.2 实验动物

ICR品系雌性小鼠,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,合格证号:0163865,0156761。饲养管理条件为:室温(23±2)℃,相对湿度为 50%~60%,自然照明。饲喂方法采用掺入饲料自由摄食,饮水均为纯净水。

1.1.3 动物饲料

基础饲料配方:玉米粉31.5%、小麦粉20%、麸皮10%、豆粕22%、鱼粉8%、骨粉2.5%、酵母粉2%、预混料4%[5]。

高脂饲料配方:78.8%基础饲料、1%胆固醇、10%蛋黄粉、10%猪油、0.2%猪胆盐[6]。

对血糖影响试验剂量组饲料配方:黄粉虫脱脂粉分别占饲料总量的20%、10%、5%,其余为基础饲料。

对血脂影响试验剂量组饲料配方:黄粉虫脱脂粉分别占饲料总量的20%、10%、5%,其余为高脂饲料。

饲料按配方混拌均匀后,用预先温热的纯净水湿润并搅拌,直至饲料软硬度适当,以模具成型后于鼓风干燥箱中90℃~100℃烘干,冷却后备用。

1.2 主要试剂与仪器设备

四氧嘧啶(Alloxan):Sigma公司;胆固醇、胆盐、肝素钠:北京奥博星生物技术有限责任公司。

HA221-50-06型超临界萃取装置:南通市华安超临界萃取有限公司;干片式快速血脂检测仪:南京丰达医疗仪器有限公司;GT-1640型日本京都血糖仪;GZX-9240型数显鼓风干燥箱;分析天平,电子秤,等。

1.3 黄粉虫脱脂粉对小鼠血糖影响试验的动物分组及处理

1.3.1 糖尿病小鼠模型的建立

将小鼠购回适应实验室环境1周后,选25 g~27 g者,禁食(不禁水)12 h后,留10只腹腔注射生理盐水为对照,其余分别按总剂量270 mg/kg体重间隔24 h分两次腹腔注射0℃~4℃下现配的四氧嘧啶生理盐水溶液,用于制备糖尿病模型[7]。前后两次注射剂量为3∶2,第一次注射完4 h后,各组均给予5%的葡萄糖水自由饮用,预防出现低血糖引起小鼠死亡,4 h后换为普通纯净水;第二次注射完后自由进食和饮水。每天于固定时间测定各组小鼠平均进食量和平均饮水量。1周后禁食(不禁水)12 h,断尾取血测定空腹血糖,血糖值大于11.1 mmol/L者视为造模成功[8-9]。

1.3.2 动物分组及处理

将成模小鼠按血糖值从小到大排序,淘汰血糖值大于25 mmol/L和小于11.1 mmol/L者,取其中40只按随机区组分组设计方法平均分为4组,分别为模型对照组和高、中、低剂量组。其中模型对照组喂给基础饲料;喂给含黄粉虫脱脂粉20%、10%、5%饲料者分别为高、中、低剂量组。每天更换垫料及清洗饮水瓶。连续喂养20 d,分别于第10天和第20天禁食(不禁水)12 h,断尾采血测定空腹血糖值。

1.4 黄粉虫脱脂粉对小鼠血脂影响试验的动物分组及处理

选取(23.5g±1)g小鼠50只随机分为5组,喂饲基础饲料为正常对照组,喂饲高脂饲料为模型对照组,另喂饲含黄粉虫脱脂粉20%、10%、5%的高脂饲料者分别为高、中、低剂量组。保证小鼠良好的生活卫生条件,连续喂养30 d后,禁食(不禁水)12 h,摘眼球采血于事先制备好的抗凝管中,测定小鼠全血中总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。

1.5 统计学处理

数据以(±s)表示,采用 t检验,以 Excel 2003 软件分析数据。

2 结果与分析

2.1 建模期间四氧嘧啶对小鼠进食量、饮水量和血糖值的影响

开始时各组小鼠进食量和饮水量差别不明显,给药各组小鼠腹腔注射四氧嘧啶后第3天开始出现多饮、多食、多尿的症状,从第3天至第7天给药各组小鼠平均进食量和饮水量均显著高于对照组(见表1),而对照组小鼠平均进食量和饮水量比较平稳。与对照组小鼠相比,给药组小鼠血糖水平均极显著升高,说明该方法建立小鼠糖尿病模型成功。

表1 糖尿病模型及对照组小鼠的平均进食量、平均饮水量和血糖值(±s)Table 1 Average feed and water intake and blood glucose level of control and diabetes model group(±s)

表1 糖尿病模型及对照组小鼠的平均进食量、平均饮水量和血糖值(±s)Table 1 Average feed and water intake and blood glucose level of control and diabetes model group(±s)

注:与对照组相比,a:P<0.01。

血糖值/(mmol/L)对照组 10 3.9±0.3 5.2±0.5 3.78±0.21糖尿病建模组 70 7.3±1.3 31±4.4 13.25±4.47a组别 实验动物数平均进食量/(g/d)平均饮水量/(mL/d)

2.2 黄粉虫脱脂粉对糖尿病小鼠血糖水平的影响

黄粉虫脱脂粉对糖尿病小鼠血糖水平的影响,见表2。

表2 黄粉虫脱脂粉对各组小鼠血糖水平的影响(±s)Table 2 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood glucose level in varided group mice(±s)

表2 黄粉虫脱脂粉对各组小鼠血糖水平的影响(±s)Table 2 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood glucose level in varided group mice(±s)

注:a与喂养开始相比P<0.05。

第20天血糖值/(mmol/L)模型对照组 13.31±2.62 16.06±6.51 13.48±6.38高剂量组 13.33±2.74 15.04±6.84 11.70±5.82中剂量组 13.28±2.50 15.16±5.40 11.14±4.41低剂量组 13.11±2.52 18.25±6.89a 17.28±8.65a组别 喂养开始血糖值/(mmol/L)第10天血糖值/(mmol/L)

从表2可知,连续喂给糖尿病模型小鼠黄粉虫脱脂粉10 d和20 d后,高、中、低剂量组与对照组小鼠相比,血糖值均未见显著差异。同时,高、中同一剂量组小鼠喂养前后其血糖值也无显著差异,低剂量组小鼠血糖值还有继续升高趋势。说明不同剂量的黄粉虫脱脂粉对该糖尿病模型小鼠血糖水平无显著降低作用。

2.3 黄粉虫脱脂粉对不同处理小鼠血脂水平的影响

黄粉虫脱脂粉对不同处理小鼠血脂水平的影响,见表3。

表3 黄粉虫脱脂粉对各组小鼠血脂水平的影响(±s)Table 3 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood lipid level in varided group mice(±s)

表3 黄粉虫脱脂粉对各组小鼠血脂水平的影响(±s)Table 3 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood lipid level in varided group mice(±s)

注:a与正常对照组相比P<0.05,b与模型对照组相比P<0.05,bb与模型对照组相比P<0.01。

LDL-C/(mmol/L)正常对照组 1.76±1.41 0.47±0.54 0.95±1.03 0.51±0.57模型对照组 3.47±1.33a 0.95±0.49a 1.95±0.73a 0.89±0.85高剂量组 1.73±1.40b 0.41±0.10bb 0.71±0.74bb 0.96±1.14中剂量组 1.89±1.63b 0.50±0.61bb 1.02±0.75bb 0.64±0.91低剂量组 1.96±1.46b 0.55±0.81b 0.78±0.76bb 0.92±1.49组别 TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)

从表3数据可知,模型对照组小鼠全血TG和TC含量均显著高于正常对照组。对于喂饲高脂饲料时血液中HDL-C含量是升高还是降低文献中各有报道,本实验中HDL-C含量模型对照组也显著高于正常对照组,这可能与TC水平升高幅度较大有关,其原因需要进一步探索。但仍能够说明该方法建立小鼠高血脂模型成功。

高、中、低剂量组小鼠全血中TC、TG和HDL-C含量均显著或极显著低于模型对照组,且趋于正常对照组水平;而各剂量组之间差异不显著。说明给小鼠喂饲高脂饲料时,掺入不同剂量黄粉虫脱脂粉能有效抑制其血脂水平的升高,且5%剂量即可达到理想效果。

3 结论与讨论

给该试验四氧嘧啶致糖尿病模型小鼠饲料中添加不同剂量黄粉虫脱脂粉,均不能有效降低其升高的血糖水平。而给小鼠高脂饲料的同时,在其中添加黄粉虫脱脂粉含量达5%剂量时,即可有效预防其血液甘油三酯和胆固醇水平的升高。

本文黄粉虫脱脂粉对血糖水平的影响试验中采用注射四氧嘧啶法制备小鼠糖尿病模型,其机理是部分损伤小鼠胰腺β细胞导致胰岛素分泌不足造成,试验中未发现对已升高的血糖水平有显著改善作用;但对于常见的由于胰岛素受体异常所致糖尿病是否有效需进一步研究。在其对血脂水平的影响试验中本文只进行了预防性试验,发现有显著抑制小鼠血脂水平升高的效果;但对于已形成高血脂水平的小鼠是否有治疗性作用也需进一步研究。

[1]白耀宇,程家安.我国黄粉虫的营养价值和饲养方法[J].昆虫知识,2003,40(4):317-323

[2]邓希海.黄粉虫工厂化规模养殖技术[J].江西水产科技,2008(1):27-32

[3]李汉臣,吉志新,高素红,等.黄粉虫的营养保健作用[J].河北科技师范学院学报,2007,21(3):17-21

[4]李汉臣,吉志新,安丽红,等.黄粉虫的营养保健作用初报[J].河北职业技术师范学院学报,2002,16(1):26-28

[5]苗明三.实验动物和动物实验技术[M].北京:中国中医药出版社,1997:261

[6]中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[M].北京:人民卫生出版社,2003:35-37

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