李书宇，陈伦林，邹小云，邹晓芬，张建模，熊 洁，彭小松，宋来强*

(1.江西省农业科学院 作物研究所/油料作物重点实验室，江西 南昌 330200;2.江西农业大学，江西 南昌 330045)

小孢子培养是指将植物的小孢子直接从花药中分离出来进行培养，诱导成胚，进而发育成完整植株的一种技术。该技术可广泛应用于杂优亲本培育、常规育种、遗传群体构建和转基因等研究[1]。1982年Lichter[2]首次通过甘蓝型油菜小孢子培养获得再生植株后，国内外许多学者对影响甘蓝型油菜小孢子培养的诸多因素进行了广泛的研究[3－6]，小孢子胚的再生频率有了很大提高。尽管近年来油菜小孢子培养体系不断完善，但该技术在应用过程中仍存在以下问题:甘蓝型油菜小孢子培养供体材料大多植于大田，受基因型和环境影响较大，小孢子培养胚诱导频率总体偏低，且油菜花期相对集中，按照小孢子胚诱导及生长发育的速度，当观察到无法获得胚状体时，很可能已错过花期，无法再重新取样培养。

本试验对影响小孢子培养胚状体发生的因素进行深入研究，进一步优化培养体系，提高胚状体的发生频率;对甘蓝型油菜小孢子培养配方进行简化，研究热击培养1d后倒置显微镜下小孢子的培养反应与最终产胚率的关系，建立快速评估最终产胚率的参考指标，在有限花期内提高工作效率。通过以上研究，进一步优化培育技术、简化操作环节，提高工作效率，对于小孢子培养技术大规模应用于育种实践具有较大意义。……