虎金丸对肝纤维化大鼠Nrf2/Bach1蛋白表达的影响
2013-08-21黄兆胜熊天琴李红侠赵玉民廖嘉仪
符 崖 黄兆胜 熊天琴 李红侠 赵玉民 廖嘉仪
广州中医药大学,广东广州 510006
在肝纤维化的发生发展中,氧化应激起着重要作用,机体氧化/抗氧化的失衡,是肝脏炎症及肝纤维化的发展重要因素之一。核因子相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)、转录因子 Bach1(BTB and CNChomology1)在机体氧化/抗氧化失衡的调节中起着重要的作用,Nrf2通过调节肝脏抗氧化酶基因的表达增加肝脏抵抗氧化应激的能力;Bach1为Nrf2的阻遏剂,和Nrf2竞争ARE下调抗氧化酶基因的表达[1-4]。
虎金丸由虎杖、郁金、田七、灵芝、泽泻、山楂6味组成,具有活血化瘀、益气行滞的功效。临床上用于治疗肝纤维化有较好的疗效[5]。研究表明虎金丸能保护CCl4所致大鼠肝细胞急性损伤,具有确切的抗肝纤维化作用[6]。本研究采用CCl4诱导的大鼠肝纤维化,观察虎金丸对肝纤维化大鼠Nrf2/Bach1蛋白表达的影响,初步探讨虎金丸调整机体氧化应激抗肝纤维化的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SD雄性大鼠,SPF级,体重150~180g,购自广州中医药大学实验动物中心,生产许可证号SCXK(粤)2008-0020。
1.2 药物及试剂
虎金丸供试液系按处方比例各药材加水煎煮2次,过滤,浓缩为含生药1g/mL,临用时稀释备用;阳性对照药水飞蓟素(陕西森弗高科实业有限公司);四氯化碳(广州光华化学厂有限公司,批号20110930);MDA、SOD、GSHPx检测试剂盒(南京建成生物研究所);兔抗Nrf2多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司,规格1mg/mL),兔抗Bach1多克隆抗体(武汉三鹰生物技术有限公司,规格37μg/150μL)。Elevision plus免疫组化试剂盒(福州迈新生物技术开发公司);Masson三色染色液(广州威佳科技有限公司,批号20110315);……
