盛小皓

四川省阿坝州九寨沟县疾病预防控制中心 623400

为了探讨酶联免疫吸附法在沙门氏菌检测中临床应用效果，本研究于2012年1月～2012年6月对我院接受的临床样本应用沙门氏菌特异性单抗3～47～26建立竞争ELISA法来进行沙门氏菌检测，通过与国标法对样品进行比较检测，分析该方法在沙门氏菌检测中的敏感性、特异性和准确性，现将分析结果报道如下。

资料与方法

样本来源:2012年1月～2012年6月选择我院接受的临床粪便样本105份。

检测方法:①用碳酸盐缓冲液(0.05mol/L pH9.6)稀释肠炎沙门氏菌LPS～poly～L～Lysine 80g/L包被96孔酶标板，100μl/孔，用封板膜封板后置37℃温育1h。②小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。③取未致敏的40孔酶标板，将样品和酶标抗体室温作用90min［1］。④取包被好的酶标板，小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。⑤将作用后的样品与酶标抗体混合液移入包被板，每样加两孔，100μl/孔。留下3孔分别设阳性、阴性、空白对照。用封板膜封板后置37℃温育1h。⑥取包被好的酶标板，小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。⑦取出酶标板，迅速加入50μl终止液，加入终止液后应立即在酶标仪上测定OD490光吸收读值。⑧以国标法作为金标准进行ELISA方法的敏感性和特异性分析，另外采用稀释法进行国标法和ELISA试验的检测限测定［2］。

数据处理:所有统计均在Windows SPSS17.0中完成，以抑制率的大小判定样品的阴阳性，抑制率按以下公式计算样品抑制率(%)=(阴性对照 OD值 ～样品 OD值)/阴性对照 OD值 ×100%。……