响应面优化三氯乙酸沉淀测定豆酱游离氨基酸中蛋白质
2013-08-07武俊瑞代金月邱小玉岳喜庆
食品科学 2013年10期
张 苗,武俊瑞,代金月,邱小玉,岳喜庆*
(沈阳农业大学食品学院,辽宁 沈阳 110866)
豆酱(soybean paste)是我国四大传统的发酵豆制品之一,它是以大豆为主要原料制成的酱,经自然发酵而成的半流动状态的发酵食品,也称黄豆酱、黄酱或大豆酱[1]。传统发酵豆酱具有独特的风味,豆酱具有独特的风味,其风味是由酿造过程中微生物引起的生物化学反应形成的。把原料中的不溶性高分子物质,分解成低分子化合物,这些物质的相互结合形成了种类繁多的呈味物质[2]。这些呈味物质主要是氨基酸。因此豆酱中氨基酸的种类和数量决定了豆酱的品质,分析其含量和数量就显得尤为重要。
氨基酸自动分析仪对所进样品要求很严格,需要所进样品除去有机酸、脂肪、蛋白等物质。虽然样品溶解在水中后,游离态氨基酸可溶解在水中,但非水解样品溶液中的部分水溶性蛋白经过高速离心仍无法除去,因此需选用蛋白沉淀剂除去经高速离心后仍无法去除的水溶性蛋白[3]。三氯乙酸(TCA)沉淀法原理是:TCA作为蛋白质变性剂可使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水基团,使之聚集沉淀[4]。本研究利用蛋白质遇TCA产生沉淀的特点,结合双缩脲比色法测其含量[5],以此为指标来确定TCA沉淀测定豆酱游离氨基酸中蛋白的最佳实验条件,为氨基酸含量测定提供简便可行的方法。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
豆酱,采自当地农家自制的传统发酵豆酱,样品保存于密封袋中,4℃冷藏备用。……
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