适合蜂王浆蛋白质组的双向电泳技术
2013-08-07赵方圆吴亚君韩建勋葛毅强
赵方圆,吴亚君,韩建勋,陈 颖,*,葛毅强*
(1.中国检验检疫科学研究院,北京 100123;2.中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083;3.中国农村技术开发中心,北京 100045)
蜂王浆(royal jelly,RJ)是由哺育蜂头部咽下腺和上鄂腺共同分泌的具有酸、涩、辣、甜并略带特殊芳香气味的乳白色或淡黄色的浆状物,它在蜜蜂的等级分化中发挥着重要的作用[1]。对于人类,蜂王浆具有抗癌、免疫调节、降血压、抗氧化抗菌等多种生理药理功能[2-5],除了10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-decenoic acid,10-HDA),蜂王浆蛋白在其中也发挥着极其重要的作用[6-7]。2006年西方蜜蜂基因组联盟完成了其全基因组测序和序列分析,王浆主蛋白(major royal jelly proteins,MRJPs)基因序列、蛋白功能已得到解析,使MRJPs成为近年来研究非常热门的营养蛋白[8],基于双向电泳技术的蜂王浆蛋白质组学的研究国内外已有相关报道[9-13]。Sano等[9]利用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术研究了非洲蜜蜂及欧洲蜜蜂(意大利蜜蜂)所产蜂王浆的特性。Schonleben等[10]利用一维电泳、二维电泳及多维液相色谱一共鉴定出蜂王浆中含有20种不同的蛋白。国内李建科等[14]利用双向电泳、质谱等蛋白质组学研究方法对蜂王浆新鲜度、不同种蜜蜂产的蜂王浆蛋白质组[13]进行了研究。
2-DE是研究蛋白质组的重要技术之一,它的原理是首先根据蛋白质的等电点不同采用等电聚焦电泳(isoelectric focusing,IEF)分离蛋白质,然后再按蛋白质分子质量的不同利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)将复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。蛋白质组学技术作为前沿技术,在食品蛋白质研究中也得到越来越广泛的应用[15-18]。……
