胡英会，张 竞，陶占领

（1.郑州华信学院 医学院，河南 郑州 451100；2.郑州安图绿科生物工程有限公司，河南 郑州 450016）

梅毒螺旋体抗体诊断试剂的临床应用

胡英会1，张 竞1，陶占领2

（1.郑州华信学院 医学院，河南 郑州 451100；2.郑州安图绿科生物工程有限公司，河南 郑州 450016）

目的：同时用评价试剂和参比试剂检测436例血清样本，探讨评价试剂与参比试剂检测结果的符合率.方法：评价试剂采用化学发光法，参比试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附试验；并通过卡方检验来判断两试剂盒间有无显著差异.结果：评价试剂和参比试剂阳性符合率为98.25％，阴性符合率为99.47％.两种试剂通过卡方检验比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论：评价试剂与参比试剂的检测结果具有很好的一致性，评价试剂可以用于梅毒感染的辅助诊断.

化学发光法；酶联免疫吸附试验（ELISA）；梅毒螺旋体

梅毒螺旋体（Treponema Pallidum）是对人体有致病性的密螺旋体的一种，为梅毒的病原体，具有较强的传染性和慢性复杂的病理，它几乎可以引起全身所有系统的组织和脏器的损害及病变，导致功能失常，组织破坏，乃至死亡.梅毒螺旋体引起的梅毒是仅次于艾滋病的严重危害人民健康的性传播疾病.1949年之前梅毒也曾在我国广泛流行，50年代初期，梅毒在全国绝大部分地区基本绝迹.但在80年代后期，梅毒患者又陆续在全国各地出现，从沿海地区向内地蔓延，近年来呈明显上升趋势.控制梅毒传播，重点在于对传染源的发现和控制，因此加强对梅毒的普查，已成为防止该疾病蔓延的重要手段.

评价试剂采用双抗原夹心和化学发光技术相结合的方法，对人血清或血浆中梅毒螺旋体抗体进行检测.为了考核该试剂盒的各项性能，对其进行临床应用评价.

1 材料与方法

1.1标本来源

收集郑州大学第一附属医院门诊或住院治疗呼吸道感染的患者样本436份，收集的样本包括以下的人群：处于不同感染期的梅毒阳性样本，健康人群样本，孕妇样本，样本库中保存的梅毒阳性标本以及可能会对测定结果造成干扰的如风湿患者、癌症患者、非梅毒性病患者的样本.记录检测对象的编号以及与梅毒相关的临床诊断，按照说明书的要求收集样本.

1.2试剂

评价试剂：郑州安图绿科生物工程有限公司的梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（化学发光法）（批号20051008）；参比试剂：上海科华生物工程股份有限公司的梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（酶联免疫吸附试验法)（批号：20051102）.

1.3方法

436份样本采用评价试剂与参比试剂进行对照测定.评价试剂采用化学发光法，参比试剂盒采用酶联免疫吸附试验，两种检测测方法均严格按照试剂盒操作说明书步骤进行.

1.4统计学方法

采用卡方检验进行统计分析，比较两试剂盒的差异程度.

2 结果

两试剂盒检测结果统计如表1.

表1

依据卡方检验公式计算卡方值：χ2=0.50，ν=1，P＞0.05，说明两试剂盒间无显著差异.

3 讨论

目前关于梅毒的临床和实验室诊断方法主要有：组织病理检查；梅毒螺旋体检查；梅毒血清学试验[1-6].而目前国内外已批准上市的梅毒实验室诊断方法有以下几种：梅毒甲苯胺红不加热血清实验（TRUST），梅毒快速血浆反应素实验（RPR），梅毒螺旋体抗体ELISA双抗原夹心法，梅毒螺旋体抗体CLIA双抗原夹心法（北京科美东雅），梅毒螺旋体血凝法(英国omega diagnostics)，梅毒螺旋体凝集法（日本Fujirebio），梅毒螺旋体抗体胶体金法.其中TRUST和RPR检测的是标本中的反应素而不是梅毒螺旋体抗体，虽然操作简便快速，但是灵敏度和特异性都较低，而且用肉眼观测结果，有一定的主观性；梅毒螺旋体血凝法和凝集法的灵敏度和特异性均较高，一般认为是梅毒检测的确认方法，但是此类产品反应时间长；化学发光法作为20世纪90年代才兴起的一种新型检测技术，除具有检测方法简单快速的优点之外，还具有灵敏度高、检测线性范围宽等优点，因此越来越多的受到临床诊断实验室的关注，是近年来该领域研究的热点. ELISA双抗原夹心法和CLIA双抗原夹心法均采用基因重组抗原作为主要原材料，灵敏度和特异性均达到了较高水平，而且操作方便，易于实现自动化和大量标本的筛查，因此成为目前主要的检测方法[8-10].

从两试剂盒的比较结果可以看出，两试剂盒具有较高的符合率，这与他们所使用的原材料（都是基因重组抗原）和方法（双抗原夹心法）比较相似有很大的关系，两家试剂盒检出的56份阳性标本经临床诊断和询问患者病史，其中有8例为早期梅毒，21例为一期梅毒，12例为二期梅毒，15例为治疗后检测.通过对不同人群的比较，发现20岁以下人群的阳性率最低，70岁以上年龄组阳性率偏高，孕妇和癌症患者与一般人群并无区别[7].对于一些早期感染的患者，没有明显的症状，通过梅毒螺旋体抗体检测，对梅毒感染的发现和及时治疗有很大意义.

两试剂盒中共有3份标本测得不同结果，均在临界值附近，对这3份标本用日本富士公司的TPPA试剂盒复测，结果均为阴性.结合临床诊断和生活史，排除了梅毒感染的可能，应为假阳性.根据临床诊断，这3份标本并无特殊疾病，对于具体的干扰原因还无法确定.

综上所述，梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（化学发光法）具有较高灵敏度高，特异性强，可以用于临床梅毒感染的辅助诊断.

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