丁淑云，康绍叁，景中民，郑振武，张秀平，高伟兴

(1河北联合大学附属医院曹妃甸区医院，河北唐山063000;2河北联合大学附属医院;3驻马店市中心人民医院)

联合多烯紫杉醇治疗雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)的有效性已得到临床研究证实，但发现其延长患者的生存时间极为有限［1，2］。酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490是一种人工合成的苯亚甲基丙二睛的脂类衍生物，通过阻断JAK/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)信号通路，能够抑制多种肿瘤细胞生长，诱导其凋亡。2010年12月～2013年1月，我们观察了多烯紫杉醇联合AG490对前列腺癌DU-145细胞增殖凋亡的影响，旨在探讨二者联合应用治疗晚期前列腺癌的可行性及机制。

1 材料与方法

1．1 材料 人前列腺癌细胞株DU-145购自中国科学院上海细胞库。多烯紫杉醇为Sigma公司产品，AG490为Merck公司产品，胎牛血清、胰蛋白酶及F12培养基均为美国Gibco公司产品，噻唑蓝(MTT)购自天津灏洋生物有限公司。Annexin-V凋亡试剂盒为美国BD公司产品。Bcl-2兔抗人多克隆抗体和DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物制品有限公司。

1．2 实验方法

1．2．1 细胞培养 将 DU-145细胞(培养于含有90%F12的培养液中)置于含10%胎牛血清，青、链霉素各100 U/mL的培养基中，37℃、5%CO2培养箱内常规培养，每24 h更换培养液1次。细胞90%汇合时用0．25%胰蛋白酶消化传代，每周2、3次，取对数生长期细胞进行实验。

1．2．2 细胞干预及细胞生长抑制率检测 将DU-145细胞以1×105/mL密度接种于96孔培养板中，150μL/孔，每个浓度设6个复孔，置于37℃、5%CO2培养箱内培养24 h。待细胞贴壁后分为三组。紫杉醇组分别加入10、100、1 000 nmol/L的多烯紫杉醇;AG490组分别加入 10、20、40、80 μmol/L的AG490;联合组分为联合1、2、3组，分别加入10、100、1 000 nmol/L的多烯紫杉醇及40μmol/L的AG490，继续培养48 h。……