丛枝菌根真菌孢子最适消毒方法及最佳培养基的研究
2013-06-07赵腊梅刁亚楠金海如
赵腊梅,刁亚楠,金海如
(浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江 金华 321004)
菌根是自然界中一种普遍的植物共生现象,它是土壤中的菌根真菌菌丝与高等植物营养根系形成的一种联合体。由于部分真菌不在根内产生泡囊,但都形成丛枝,故简称丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)。丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza fungi,AMF)就是这样一类内生菌根真菌,它能与80%的陆地植物建立共生关系[1-2],是迄今为止发现的所有类型菌根真菌中种类最全、数量最多的一类真菌。由于AMF属于专性共生真菌,目前仍未能实现离体培养,只能将其接种在活体根系上或是与其寄主根系一起培养,常用的培养方法有盆栽法和离体双重培养法。盆栽法的培养周期长、培养量大,又不便运输,已较少使用[3];而离体双重培养法是目前国际上研究菌根真菌侵染机理、共生双方物质和信息交换机制的主要方法[4],对AMF生理生化研究以及菌剂的生产均有较大的贡献。
离体条件下真菌孢子的萌发受多种因素的影响,例如消毒处理、培养基成分、pH酸碱度、重金属含量、糖含量、孢子密度、孢子自身分泌的抑制物等[5]。而探究AMF孢子的最佳表面消毒处理是实现离体双重培养的前提。因此,试验从灭菌方法和培养基两个方面来优化AMF孢子的萌发最优条件。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试菌种 根内球囊霉菌(Glomus intraradices),由北京农林科学院植物营养与资源研究所“丛枝菌根真菌种质资源库BGC AH01”提供。
1.1.2 培养基 (A)0.8%琼脂培养基:准确称取0.80 g琼脂溶解于1 00 mL蒸馏水中,pH 6.5,120℃灭菌25 min。(B)0.8%琼脂蔗糖培养基:称取0.8 g琼脂和3 g蔗糖溶解于100 mL蒸馏水中,pH 6.5,120℃灭菌25 min。……
