刘明然 （山东省临沂市畜牧局动物卫生监督所 276004）

鸡大肠杆菌体外耐药性试验

刘明然 （山东省临沂市畜牧局动物卫生监督所 276004）

本文就临沂地区鸡大肠杆菌体外耐药性情况进行了试验，通过15种常用抗生素的药敏试验，以质控菌ATCC25922为质量控制，筛选出临沂地区鸡大肠杆菌病敏感度较高的药物是头孢菌素类、阿米卡星、氟苯尼考等，为临沂地区鸡大肠杆菌病的防治提供了依据。

大肠杆菌病 耐药 药敏试验

随着临沂地区养鸡业的持续发展，特别是集约化程度的加深和鸡群新品种的增多，鸡大肠杆菌病的流行日趋严重，给养殖户造成了严重的经济损失[1]。实际生产中对该病的防治多采用药物，为了给临床筛选有效的抗生素提供科学依据，避免盲目用药，本试验对分离自临沂地区的45株鸡源致病性大肠杆菌做了体外耐药性测定。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 从临沂地区疑似大肠杆菌病的病死鸡体内分离纯化，并经生化鉴定和病源性测定的致病性大肠杆菌，筛选出45株进行体外耐药性测定，编号为LY1-LY45。

1.1.2 仪器和设备 生化培养箱、高压灭菌锅、显微镜、超净工作台、冰箱、常用玻璃器材等，由临沂市检测中心提供。营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、麦康凯琼脂培养基、伊红美蓝琼脂、SS琼脂培养基、等培养基，葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖等细菌微量生化反应管，均购自上海市医学化验所试剂厂及杭州天和微生物试剂有限公司。药敏质控菌株ATCC25922购自中国兽医药品监察所。

1.1.3 药敏试纸 氨苄青霉素(AMP，氨)、阿莫西林(AMX，阿)、诺氟沙星(NOR，诺)、氧氟沙星(OFL，氧)、环丙沙星(CIP，环)、阿米卡星(AMK，阿)、庆大霉素(GM，庆)、卡那霉素(KM，卡)、链霉素(SM，链)、新霉素(NM，新)、氟苯尼考(FLO，氟)、氯霉素(CMP，氯)、头孢拉啶(CED，拉啶)、头孢唑啉(CFZ，唑啉)、头孢噻肟(FTX，噻肟)均购于杭州天和微生物试剂有限公司。

1.2 方法

无菌条件下，将大肠杆菌分别划线接种于营养琼脂平板上，37℃培养18h后，挑取单菌于0.85%生理盐水中，震荡混匀后与麦氏标准比浊管比浊，使接种菌液浓度为1×109个/ml。用灭菌的涂布器蘸取菌液后涂布整个培养基表面，反复数次，每次将平板旋转60度，最后沿平皿周边绕两圈，保证涂布均匀。待平板上的水分被琼脂完全吸收后开始贴纸片。用尖嘴镊子将药敏纸片平放于平板上，并轻压使其紧贴在平板表面，药敏纸片一经放置不要移动，两纸片中心相距不少于24mm，纸片与平皿边缘不少于15mm[2]。药敏试验判断标准见表1。

表1 每片含药量判定标准-抑菌圈直径 (mm)

2 结果

具体结果见表2。

表2 45株鸡大肠杆菌对15种药敏试验结果

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从表中可以看出，临沂地区鸡大肠杆菌敏感度较高的药物是头孢噻肟、头孢唑啉、头孢拉啶、氟苯尼考和阿米卡星，中度敏感的有庆大霉素、氧氟沙星、卡那霉素和诺氟沙星，而氨苄青霉素、阿莫西林、氯霉素、环丙沙星、链霉素、新霉素、敏感度较低。

3 讨论

通过15种常用抗生素的药敏试验，以质控菌ATCC25922为质量控制，筛选出临沂地区大肠杆菌病敏感度较高的药物是头孢菌素类、阿米卡星、氟苯尼考等，其中以头孢类药物敏感度最高。阿米卡星与氟苯尼考敏感度较相关报道有明显下降[3-7]，尤其是氟苯尼考，作为一种氯霉素类的兽用广谱抗菌药，抗菌活性高于氯霉素及甲飒霉素，尤其对一些耐氯霉素及甲讽霉素的细菌仍然表现出较高的抗菌活性，因此，在动物的疾病防治上尤其是食品动物，具有广阔的应用前景[8]。但在此次药敏试验中，氟苯尼考敏感率仅为64.4%，远低于头孢类药物，临沂地区的鸡养殖场户在实际生产中应高度重视，尽量降低对氟苯尼考的使用，避免因药物耐药而失去最佳治疗时间，造成经济损失。

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1007-1733(2013)05-0015-02

2013–03–22）