陈志红，赵媛媛，张守亮，林建扬，魏法星，朱伟

(1.江苏大学附属人民医院普外科，江苏 镇江212002;2.江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏 镇江212013)

目前唯一有效治疗终末期器官功能衰竭的方法就是器官移植，但是由于存在器官移植排斥反应，传统的终身免疫治疗常常引起各种器官功能衰竭而导致移植失败［1-2]。因而发展一种新途径诱导特异性免疫耐受，对于防止发生急性和慢性排斥反应以及避免器官移植后终身免疫抑制治疗都是非常重要的。在器官移植中，T 细胞是介导移植排斥反应的主要效应细胞之一，而OX40/OX40L 可以提供T 细胞活化后进一步增殖、分化并最终形成效应T 细胞或者记忆细胞的关键共刺激信号［3-5]。因此阻断OX40/OX40L 间的相互作用，有可能诱导受体针对移植物抗原的特异性T 细胞失能从而产生免疫耐受。已有研究表明，阻断OX40/OX40L 信号通路可以有限地延长移植皮肤的存活［6]，对移植物抗宿主病有潜在治疗意义［7]。

本实验拟构建含人OX40-IgG1 融合基因的重组腺病毒载体，通过转染293A 细胞，包装出具有感染性的完整病毒颗粒，进一步感染肝HL-7702 细胞，并检测了其感染效率及相关目的基因和蛋白的表达。这将为进一步进行基因诱导免疫耐受从而抑制肝移植排斥反应的研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 质粒、菌株和细胞株 pAdTrack-CMV 穿梭质粒由复旦大学钟江老师惠赠;pAdeasy-1 由本室冻存;大肠埃希菌DHα、BJ5183 菌株由本室冻存;293A 细胞株来自加拿大Microbix Biosystems 公司;肝细胞HL-7702 来自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库;小鼠抗人OX40 mAb (1F7)由苏州大学张学光教授惠赠。……