潘皓，韩尧辉，张赢予，毛俊倩，周艳芳，王好，鲍永辉，赵龙，张国辉

(江苏大学附属人民医院心内科，江苏镇江212002)

糖尿病导致的心血管疾病是糖尿病患者健康的主要威胁之一。糖尿病引起的代谢紊乱直接影响心肌细胞、心脏成纤维细胞、内皮细胞的功能，促进心肌细胞的凋亡、坏死，心肌间质胶原的沉积，微血管病变，神经病变等，导致心功能下降，即糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy，DCM)［1]。DCM 的发病过程是多因素共同作用的结果［1]，主要包括高血糖，血脂异常，胰岛素抵抗，氧自由基产物的增加，细胞内钙超载等。炎症反应是糖尿病引起的靶器官损害的病理生理变化中的关键环节。胞内高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1，HMGB1)作为体内一个多种急、慢性炎症反应的重要的炎症介质和炎症调节分子，参与了高糖引起的炎症反应［2-3]。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是一个多效性分子，广泛参与了细胞的增殖、分化、生长以及炎症和细胞外基质沉积的调节等多种活动。在各种原因导致的心脏重塑中TGF-β1通路是关键的信号通路之一［4]。本研究观察高糖作用心脏成纤维细胞不同时间后HMGB1、TGF-β1 表达量的变化以及HMGB1 siRNA 对高糖诱导的心脏成纤维细胞TGFβ1 表达量的影响。

1 材料与方法

1.1 动物和主要试剂

健康的3 周龄C57/BL6 小鼠，雌雄不限，由江苏大学动物实验中心提供。DMEM 低糖培养基、胰酶(美国Gibco 公司)，标准胎牛血清(美国Hyclone公司)，波形蛋白(vimentin)抗体、链霉素亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组化试剂盒、DAB 显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)，转染试剂RNAiMax、Trizol(美国Invitrogen 公司)，cDNA 第一链合成试剂盒、qPCR 扩增试剂盒(加拿大Fermentas 公司)。……