王志东 张子军

弹力纤维染色方法的改良与体会

王志东 张子军

弹力纤维广泛分布于人体的血管、肺、心脏等组织中。在研究肺腺癌弹力纤维的过程中, 摸索出比较好的弹力纤维染色方法, 现介绍如下。

1 染色程序

①切片脱蜡至水。②Lugol碘液处理5 min。③稍水洗。④5%硫代硫酸钠处理5 min。⑤流水冲洗5min。⑥75%乙醇稍冼。⑦醛品红染液处理10min；⑧75%乙醇浸洗2次,每次约10秒；⑨稍水洗；⑩Harris苏木素复染, 酒精脱水,二甲苯透明, 中性树胶封片。

2 染液配制

①Lugol碘液配制碘片:碘化钾:蒸馏水=1g:2g:100 ml,至碘片全部溶解。②醛品红染液配制碱性品红:70%乙醇:浓盐酸:三聚乙醛=0.5 g:100 ml:1ml:1ml。③Harris苏木素复染液配制苏木素精:无水乙醇:甘油:硫酸钾铝:蒸馏水:冰乙酸=2 g:100 ml:100 ml:3 g:100 ml:10 ml(配制完毕, 阳光下曝晒6周后方可使用, 并且每日摇动一次)。

3 染色结果

弹力纤维染成紫红色, 呈波浪状分布；细胞核染成蓝色；二者对比明显, 可以在充分了解组织全貌的情况下对弹力纤维的分布、堆积的量进行细致的观察, 也可以对细胞与弹力纤维的关系进行比较观察, 并且在观察弹力纤维的过程中,可同时看到肺腺癌肿瘤细胞的分化状况, 使切片更直观和醒目。此方法用时短, 染液易配制, 要求条件不高, 切片可长时间保存。

4 注意事项

在75%乙醇浸洗时, 时间要严格掌握, 并要随时在显微镜下控制染色的情况, 以便随时终止乙醇浸洗, 防止切片被75%乙醇脱色。Harris苏木素复染时, 根据染色室室温的条件将时间掌握在3~5 min。然后进行自来水冲洗返蓝, 自来水冲洗时间要充分, 返蓝要彻底, 同时也要在显微镜下进行染色控制。……