马淳 栗娜

吉林医药学院附属医院，吉林 吉林 132013

预防医院内感染的重要措施之一是医疗器械的灭菌，其方法和质量控制要求也有明确的规定[1]。灭菌效果的监测是以科学的监测方法来证实其真正的灭菌器使用的情况，以及灭菌物品的灭菌质量[2-3]。我院2009年内新购进了2台新华脉动真空压力蒸汽灭菌器和一台3M TMAttestTM 290自动阅读器，使用至今。我们通过现行的要求，设计监测方案对采用的新华脉动真空压力蒸汽灭菌器安装、调试后，在正式投入使用时开始进行质量监控验证，证明灭菌效果，能够达到除去微生物污染的目的。应用体会如下。

1 材料

新华脉动真空压力蒸汽灭菌器、3MTMAttestTM 290自动阅读器、3M一次性化学B-D测试包、标准生物测试包（内含生物指示剂和第五类化学指示卡—爬行卡、3M化学指示胶带。

2 方法

2.1 物理监测

每锅物品灭菌时，都要严格控制灭菌时间、灭菌温度及灭菌器压力，监测护士认真记录各项参数，应符合灭菌效果的要求。灭菌器运行一个灭菌周期后监测护士确认各项参数正确无误后签名并将记录单存档。物理监测过程中监测参数发生错误时应立即分析原因进行改进直至监测结果符合要求，不得发放物理监测不合格的灭菌物品。

2.2 B-D实验监测

专门用于脉动真空压力蒸汽灭菌器空气排除效果的监测[4]。3M一次性化学B-D测试包放于灭菌柜内最难灭菌的位置，就是灭菌柜底层靠近柜门与排气口底前方的地方。判定结果，在经过一个灭菌周期后（134℃，灭菌3.5min）取出B-D测试指示卡，观察其颜色变化，如果B-D测试指示卡均匀一致的变黑，说明灭菌器内冷空气排除彻底，其抽真空系统良好，可正常使用。如指示卡变色不均匀或未完全变色，中央部分呈浅黑色，则提示此次灭菌失败。如果B-D实验呈阳性时，杜绝使用延长灭菌作用时间的方法，应分析原因、排除障碍对灭菌器进行彻底检查，必要时报告医院领导及设备科进行维修。B-D实验的测试要求：（1）日常灭菌监测，每日灭菌前对灭菌器的监测，灭菌柜内除测试包外无任何物品。（2）灭菌器安装、移动位置和维修后灭菌效果的监控应连续监测3次。

2.3 化学指示卡监测

（1）包外指示卡监测 每个待灭菌物品包外粘贴3M的化学指示胶带，用于监测灭菌过程中的灭菌温度和灭菌时间是否符合标准。（2）包内指示卡监测 将3M第五代脉动真空压力蒸汽灭菌器化学指示卡（爬行卡）放于待灭菌物品包内最难灭菌的部位。他可准确反映灭菌时间、灭菌温度、灭菌器饱和蒸汽的综合变化，可快速鉴定灭菌过程是否完成，判断是否达到灭菌合格要求。第五类化学指示剂像水印温度计那样在一定条件下，其指示性标识会顺着某一方向“爬行”，标识爬到某一规定区域，颜色变为指示黑色一致说明灭菌合格，反之未达到规定区域并指示黑色浅或变色不均匀，说明灭菌不合格。

2.4 生物监测

将生物监测标准测试包（内含生物指示剂和第五类化学指示卡—爬行卡）置于脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜的底层,蒸汽穿透物品的时间较长和脉动真空压力蒸汽灭菌柜温度最低处。灭菌柜内最难灭菌的位置具有代表性[5]。一个灭菌周期后，从灭菌器内取出生物标准测试包，测试包应在无菌操作下打开，打开后散热5～10min后取出生物指示剂，挤碎指示剂内安瓶，然后培养生物指示剂，将同一批次未灭菌的生物指示剂作阳性对照。两组生物指示剂放置在3M TMAttestTM 290自动阅读器内16～43℃培养3小时，培养阳性对照指示剂必须得出荧光阳性结果（阅读顺显示为红灯或+），而已灭菌的指示剂读出荧光阴性（绿灯或-）表明灭菌过程合格。

3 结果

2009年8 月～2012年12月，我院共进行脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌 4071 锅次，生物监测544锅次，监测结果均为阴性，生物监测合格率达到100%。包外包内化学监测指示卡全部合格，留点温度计所示温度在正常范围。B-D实验不合格两次，均因灭菌器部件发生故障，维修后连续监测3次，B-D实验合格。

4 讨论

脉动真空压力蒸汽灭菌方法是医院器械灭菌量可靠的方法，而最有效的灭菌方法只能通过实施最有效的监测和质量管理才可能实现。四年以来，通过科学的监测方法反复检测，我们体会到B-D实验可以迅速准确的测定脉动真空压力蒸汽灭菌器的性能。其原理是检测脉动压力蒸汽灭菌器冷空气排除效果。利用灭菌柜内室内冷空气，能否阻碍蒸汽穿透，从而影响B-D实验指示卡变色，达到排除冷空气的目的。

第五类化学指示卡（爬行卡）的使用对生物监测是一个很好的补充。它不受人为因素影响，避免了多参数化学指示剂用肉眼辨别颜色深浅所致的误差。对于有植入物的手术器械包，在生物监测不能及时出结果而又急用时，爬行指示剂可以作为提前放行的标志。

3M TMAttestTM 290自动阅读器和生物指示剂的应用，对我们日常工作具有很大的帮助，提升灭菌物品可追溯性和无菌效果保障水平。生物监测是唯一直接使用生物指示剂对灭菌效果进行挑战的方法，它是判断灭菌物品是否达到无菌菌水平的最可靠，最安全的依据。手术器械的灭菌效果监测最可靠是生物监测[6]，它是灭菌效果评价的“金标准”。医院无菌物品的质量与有效的控制医院感染息息相关，也是保证医疗、护理总体质量的重要环节。我院近几年来，严格执行各环节质量监控，加强消毒供应室管理，定期检修灭菌设备，消毒员经专业培训后持证上岗，通过各种现代化监测手段和设备，科学规范的监测方法，确保灭菌物品的质量。

[1]许乐，张春晓. 动脉真空压力蒸汽灭菌环节原因分析与对策[J].中华医院感染学杂志,2005.15（5）：536～538.

[2]于丽敏,郭阳,金鑫等. 高压蒸汽灭菌方法的研究[J].中国微生态学杂志,2000.12.（1）：52

[3]阿曙云,邵珍红,刘守英等. 生物指示剂的实验评价[J].中华医院感染学杂志,2000.10（3）：202～203

[4]黄靖雄.化学监测的一些问题[J].中华医院感染学杂志,2003.13（9）：849～850

[5]于瑞英，张文俊，文爱清. 压力蒸汽灭菌柜重点阶段监测意义的探讨[J].中华医院感染学杂志,2001.11（2）：122-123

[6]董薪，宋烽. 手术室环氧乙烷灭菌生物监测方法的改进[J].中华医院感染学杂志，2008.18（11）：1596-1597.