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利用dsDNA层层膜检测芬顿试剂对天然DNA的损伤

2012-12-27

通化师范学院学报 2012年8期
关键词:实验检测

(甘肃工业职业技术学院化工学院,甘肃天水74025)

利用dsDNA层层膜检测芬顿试剂对天然DNA的损伤

廖天录,刘军

(甘肃工业职业技术学院化工学院,甘肃天水74025)

凭借聚阳离子聚乙烯亚胺(PEI)和带负电荷的DNA存在的相互之间的静电作用交替吸附在玻碳电极表面,进而形成非常有序的{dsDNA/PEI}2层层膜.采用槲皮素作为电活性指示剂来检测芬顿试剂对天然dsDNA的损伤.由于槲皮素在DNA多层膜中具有的非常特别的可逆吸入模式,这中模式能够明显分辨损伤和未损伤DNA多层膜的吸入量.由此检测芬顿反应引起的DNA的氧化性损伤,可以提供一种新的检测DNA损伤的电化学方法.

dsDNA层层膜;芬顿试剂;槲皮素;DNA损伤

DNA是生物遗传信息的基本载体.一般它的分子结构不会在活动过程中改变,然而,生物体内外部的一些物理和化学因素很有可能使得它的分子结构发生异常变化,这就称为是DNA的损伤[1].所以,研究DNA损伤的检测具有重大意义,它对于新化合物的毒性筛选、生物污染物的检控以及生态毒性学研究具有现实意义.电化学方法是检测DNA损伤的一种新的可选择的检测手段[2-3],它具有简单、快速、灵敏、价格低等诸多优点.过氧化氢与催化剂Fe2+构成的氧化体系通常称为芬顿试剂.芬顿反应产生羟基自由基对DNA的损伤已得到证实[4].本文中,采用槲皮素作为电活性指示剂与dsDNA的嵌入作用来检测芬顿试剂对天然DNA的损伤.

1 实验部分

1.1 试剂

聚乙烯亚胺(PEI,MW-1800)购于Alfa Aesar公司;小牛胸腺DNA(北京华美生物工程公……

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