陈波，薄成佳，贾瑞鹏，朱佳庚，李文成，吴然，刘昊，葛余正

(1.东南大学医学院，江苏南京 210009;2.南京医科大学附属南京第一医院泌尿外科，江苏南京 210006)

急性肾功能衰竭是临床上常见的急危重症，缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury，IRI)是其主要原因之一，病死率可高达50% ～80%［1］。近年来，随着再生医学的蓬勃发展，干细胞在急、慢性肾脏疾病治疗中的应用正日益受到关注。内皮祖细胞(endothelial progenitor cell，EPC)作为一种具有定向归巢、增殖、分化为成熟内皮细胞特性的多能干细胞，在缺血性心脏病、急性肺损伤、高血压病等多种疾病的治疗领域发挥了重要作用［2-4］。Patschan 等［5］报道，由缺血性损伤动员的EPC可对肾脏缺血组织产生保护性作用，但其研究未涉及EPC在抗细胞凋亡方面的作用。因此，我们拟观察同种异体EPC移植对肾IRI急性期的治疗效果并探讨其可能机制。

1 材料和方法

1.1 材料

雄性SD大鼠［购自南京医科大学实验动物中心(SPF级)］;EGM-MV培养基(Lonza公司);淋巴细胞分离液(上海华精生物高科技有限公司);胰酶/EDTA(Gibco公司);兔抗大鼠血管内皮生长因子(VEGF)多克隆抗体(Santa公司);TUNEL凋亡检测试剂盒(Roche公司);蛋白质印迹检测试剂盒(Bio-Rad);CM-Dil(氯甲基苯甲酰氨荧光染料V-228888)、二甲基亚砜(DMSO，Sigma公司)。

1.2 实验动物及分组

健康雄性SD大鼠30只，体重230～250 g，随机分为EPC移植组(EPC组)、缺血再灌注损伤组(IRI组)和假手术组，每组10只。EPC组:游离双侧肾蒂，夹闭双侧肾蒂45 min，恢复血流灌注后股静脉注入0.5 ml经CM-Dil标记的 EPC悬液(细胞密度1.0×106L-1);IRI组:游离双侧肾蒂，夹闭双侧肾蒂45 min，恢复血流灌注后股静脉注入0.5 ml生理盐水;假手术组:游离双侧肾蒂，暴露45 min后股静脉注入EPC悬液(剂量同EPC组)。……