甘思远， 钟雪云， 谢思明， 罗 枫

(1 广东医学院病理学教研室，广东 湛江524023;2 暨南大学医学院病理学教研室，广东 广州510632;3清远市人民医院病理科，广东 清远511518)

目前临床上对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous－cell carcinoma，ESCC)主要采用手术切除结合术后放化疗的治疗方案。随着肿瘤化疗药物的广泛应用，肿瘤治疗过程中产生的耐药性问题越来越突出，已成为肿瘤联合化疗失败的主要原因之一［1］。肿瘤细胞的多药耐药(multidrug resistance，MDR)是指肿瘤细胞对多种具有不同结构和作用靶位的抗肿瘤药物产生耐药性［2］。研究发现，ATP 结合盒(ATP－binding cassette，ABC)转运蛋白家族成员:ABCB1(ATP－binding cassette，subfamily B，member 1)基因编码的P 糖蛋白(P－glycoprotein，P－gp)、ABCC2(ATP－binding cassette，subfamily C，member 2)基因编码的多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance－associated protein 2，MRP2)通过水解ATP 获得能量依赖性的跨膜药物外排泵的功能，可将抗肿瘤药物逆浓度从细胞内泵出到细胞外，降低细胞内药物浓度并导致肿瘤细胞产生多药耐药(multidrug resistance，MDR)［3－4］。研究发现抗凋亡蛋白B 细胞淋巴瘤－2(B－cell lymphoma－2，Bcl－2)蛋白在肿瘤细胞中高表达，可阻断多种化疗药物诱导的肿瘤细胞凋亡［5］。P－gp、MRP2、Bcl－2 与肿瘤多药耐药密切相关，在肿瘤化疗耐药的发生发展中起着重要作用。

Yamada 等［6］发现，编码P－gp 的ABCB1 基因是Wnt 通路效应元件TCF4/β－catenin 复合物的一个直接目的基因，TCF4/β－catenin 途径的激活可促进P－gp 表达增加。Lim 等［7］研究发现，将与ATP 竞争糖原合成酶激酶3β (glycogen synthase kinase 3β，GSK－3β)催化活性部位的ATP 竞争性GSK－3 抑制剂6－溴靛玉红－3＇－肟(6－bromoindirubin－3＇－oxime，BIO)作用于细胞会导致β－catenin、P－gp 和MRP2 的表达增加，β－catenin 在胞浆及胞核内出现累积，P－gp 对其底物的转运功能增强，同时还激活了ABCB1 基因的启动子。

本研究将ATP 竞争性GSK－3 抑制剂BIO 作用于ESCC 细胞后，检测β－catenin 与P－gp、MRP2 和Bcl－2 表达之间的关系，细胞内游离ATP 水平的改变对P－gp 转运功能的影响，研究GSK－3β 活性和细胞内游离ATP 能量水平的改变与ESCC 的MDR的关系，以期为肿瘤临床治疗寻找新的靶点。……