刘容容 王 晔 李士勇 徐丽君

缺氧环境下MSCs促进血管内皮细胞增殖和血管形成

刘容容 王 晔 李士勇 徐丽君＊

（南昌大学第二附属医院神经内科，江西330006）

目的 探讨成人骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs）在体外缺氧环境下对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）增殖和血管形成能力的影响及其可能机制。方法 密度梯度离心法收集分离成人骨髓血MSCs并进行体外培养扩增，传代至4代进行实验，流式细胞仪鉴定MSCs表面标志。BMSCs缺氧培养0h（对照组）、12h、24h和48h后，RT-PCR检测SDF-1和VEGF基因表达，ELISA法检测细胞上清液中SDF-1和VEGF蛋白含量。HUVECs传代培养后分成三组进行实验：对照组、BMSCsCMN-HUVECs组，BMSCsCMH-HUVECs组，MTT检测三组细胞增殖能力，体外血管形成实验分析三组细胞在Matrigel上管腔样结构形成情况。结果 （1）BMSCs呈旋涡状长梭形即纤维母细胞样生长；（2）人BMSCs阳性表达CD29、CD44和CD90，而CD34、CD45和CD106为阴性；（3）BMSCs缺氧培养后SDF-1和VEGF在mRNA和蛋白水平表达均较常氧培养显著增高（P均＜0.05）；（4）BMSCsCMH明显提高HUVECs增殖能力（P＜0.05），显著增加HUVECs在Matrigel上形成管腔样结构的能力（P＜0.05）。结论 人BMSCs在缺氧环境下通过旁分泌SDF-1和VEGF提高血管内皮细胞增殖和管腔样结构形成能力，促进血管新生。

骨髓间充质干细胞；缺氧；旁分泌；血管新生

骨髓间充质干细胞具有高增殖活性和强大的自我更新能力以及多向分化潜能；还具有自分泌和旁分泌作用，能分泌许多可溶性生长因子和细胞因子［1］，已经证明BMSCs修复和分化为多种组织的能力，尤其在血管修复和重建方面成为缺血性疾病细胞治疗研究的热点。大量研究显示BMSCs移植能促进缺血组织的血管新生［2-5］，但BMSCs移植后促进血管新生的具体机制目前还不完全清楚。……