倪建成，吕述权，丁 骁，谭庆伟

(1．福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室，福建福州350002;2．福建农林大学植物病毒研究所，福建福州350002)

小叶女贞(Ligustrum quihoui Carr．)又名小白蜡，为木犀科(Oleaceae)女贞属(Ligustrum)植物，主要分布于我国华北、华中和西南地区。其叶入药，具清热解毒等功效，治烫伤、外伤，树皮入药治烫伤。近年来的研究表明，小叶女贞提取物具有显著的增强机体免疫力、止咳平喘及清除自由基等作用(韩兆东等，2008;邱世翠等，2003;杨肇亨等，1996;徐向田，2009;洪新，1995)。

1 材料与方法

1．1 试验材料

小叶女贞叶采自福建农林大学校园，经福建农林大学植保学院欧阳明安研究员鉴定;铜绿假单胞菌PAO1由中科院城市环境研究所馈赠;人肝癌细胞系BEL-7404由福建协和医院肝胆研究所提供。

1．2 试验方法

1．2．1 小叶女贞叶片提取物的制备及初步分离 干燥小叶女贞叶片(5 kg)，采用煎煮法，煮沸30 min，取煎煮液合并，减压浓缩得到粗提物。将粗提物用适量水溶解，采用大孔吸附树脂D101除糖后，通过干柱层析(100-200目硅胶，氯仿/甲醇/水=8:2:0．2)，TLC检测合并相同流分得到 Fr．1-Fr．6 共 6 个组分。

1．2．2 抗菌活性检测 将小叶女贞叶片提取物用MH培养基稀释成不同浓度的供试溶液，过滤除菌后，4℃密封保存，备用。采用微量肉汤稀释法，参考NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，对小叶女贞叶提取物抗菌活性进行评价。以在孵育24 h和48 h小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度分别为MIC和MBC。

1．2．3 体外细胞毒性测定 采用MTT法(Twentyman PR et al．，1989)测定样品对人肝癌细胞系BEL-7404增殖的抑制作用。将小叶女贞叶片提取物用细胞培养液配制成不同浓度的溶液，每样品6个重复，设置阳性对照(5-Fu，50 g/mL)，阴性对照(单细胞悬液)和空白对照(细胞培养液)。……