应用蛋白质组技术筛选人食管癌细胞系9706顺铂耐药相关蛋白

2012-11-27晁玮霞卜旺雨侯艳芳高小飞牛保华马远方齐义军

河南大学学报(医学版) 2012年1期

关键词：耐药

晁玮霞，刘琳，卜旺雨，张娟，侯艳芳，高小飞，牛保华，马远方，齐义军＊

（1河南大学医学院细胞与分子免疫学重点实验室，河南开封475004；2河南大学医学院机能实验室，河南开封475004；3河南职工医学院护理教研室，河南郑州451191）

食管癌（esophageal cancer，EC）的发病率和死亡率在世界上分别列第7位和第6位，全球每年至少有40万EC死亡病例，约有一半发生在中国［1－2］。与欧美等发达国家发生的EC组织学类型以腺癌为主的不同，中国的EC 90%属食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）［3］。目前对 EC采用以手术治疗为主、放疗和化疗为辅的综合治疗措施，但EC愈后极差，约有50%的EC患者在术后的2～3a内复发［4］，5a生存率小于10%［5］。EC愈后差的主要原因为：首次确诊的EC约有一半已发展至中晚期；肿瘤细胞具有较强侵袭性；化疗过程中获得多药耐药性等。目前，临床普遍采用顺铂（cis-diamminedichloroplatinum，CDDP）和5-氟尿嘧啶（5-FU）的标准化疗方案治疗EC，而多药耐药性是临床EC化疗失败的最主要原因之一。因此，建立人食管癌顺铂耐药细胞系、筛选耐药相关蛋白、探讨耐药作用相关分子机制，对寻找逆转食管癌耐药性的分子靶点具有重要理论意义和应用价值。

本研究以食管鳞癌细胞系EC9706为细胞模型，采用CDDP浓度递增法、间歇作用方式建立了EC9706顺铂耐药细胞系（EC9706／CDDP），细胞培养稳定同位素标记（cell culture and stable isotope labeling，SILAC）、质谱（mass spectrometry，MS）筛选和鉴定食管癌耐药相关的蛋白，以揭示食管癌耐药性发生的分子机制和提供食管癌耐药性逆转有意义的分子靶点。