快速融化离心法与虹吸法制备冷沉淀的质量评价
2012-11-22蒋燕陈宝葵林敏诗
蒋燕,陈宝葵,林敏诗
(佛山市顺德区中心血站,广东佛山528300)
冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1~5℃条件下不溶解的白色沉淀物,主要含有第Ⅷ因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子等有效成分。冷沉淀制剂中的第Ⅷ因子、纤维蛋白原含量是直接影响治疗效果的重要因素,且与制备过程密切相关。笔者对虹吸法和快速融化离心法制备冷沉淀的质量与制备效率进行了比较,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 仪器 数字控制水浴式血浆融化箱(CT-4T.6C型),大容量冷冻离心机(日立 CR-7),热合机(日本泰尔茂),电子天平(G&G),四通道半自动血凝仪(欧家隆Coag-A-Mate.XM)。
1.1.2 耗材与试剂 乏Ⅷ因子血浆,活化剂,氯化钙溶液,缓冲液,标准人血浆,上述整套试剂均为德国Dade Behring Marburg公司提供。400 ml五联采血袋(四川南格尔)。
1.1.3 原料血浆 全血采集后6 h内经2次离心,分离出新鲜液体血浆,放入-50℃速冻机速冻后,置入-30℃以下的低温冰箱保存[1]。
1.2 方法
1.2.1 取样 取原料血浆420袋,分为2组,每组有200 ml原料血浆90袋,100 ml原料血浆120袋,4名成分制备人员连续2日分别采用虹吸法与快速融化离心法制备冷沉淀。每组实验均按照30袋200 ml原料血浆、40袋100 ml原料血浆分批浸没于水浴箱进行融化。
1.2.2 虹吸法制备冷沉淀 将原料血浆浸没于2~6℃血浆融化箱中融化,另一空转移袋悬挂于水浴箱外。新鲜冰冻血浆融化时,上清血浆随时被虹吸入转移袋内,冷沉淀留在原袋中。待融化至仅有15~30 ml冷沉淀和血浆时,将冷沉淀袋和冷上清袋之间的导管热合分离[2]。
1.2.3 快速融化离心法制备冷沉淀 将原料血浆浸没于2~6℃血浆融化箱中完全融化时,批量取出所有血浆于0℃ 2 000×g离心10 min。……