外源性一氧化碳释放分子对脓毒症小鼠神经系统抗炎的调节作用
2012-11-22仇雪枫孙炳伟王敏孙艳杨国涛王波
仇雪枫,孙炳伟,王敏,孙艳,杨国涛,王波
(江苏大学附属医院烧伤整形科,江苏镇江212001)
脓毒症是严重创伤、休克及感染后常见的并发症,进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征,即便在基础与临床医学研究及重症监护手段高度发展的现代,临床治疗仍然收效甚微,死亡率居高不下。研究发现神经系统在炎症的发生发展中具有很强大的调控作用,其中以迷走神经及其分泌的递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)所构成的胆碱能抗炎通路的研究较为深入[1]。
近年研究结果证实,一氧化碳(CO)是机体内一种重要的化学气体信使,参与了炎性反应引起的氧化应激反应[2]、缺血再灌注损伤[3]、内毒素休克[4]等病理过程,发挥着重要的抗炎、抗凋亡和细胞保护作用。外源性一氧化碳释放分子(carbon monoxidereleasing molecule-2,CORM-2)是近年来新合成的一种一氧化碳复合物,经适当溶剂溶解在生理环境中可以持续释放CO。本研究组既往的研究证实,外源性一氧化碳能显著改善脓毒症时肝、肺、肾等重要脏器的功能,抑制炎症反应[5-11]。但是否能够抑制脓毒症时神经系统的炎症反应未见报道。本研究采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立小鼠脓毒症模型,以CORM-2干预,并用卡巴胆碱做阳性对照,观察其对脓毒症小鼠胆碱能递质的影响作用,旨在研究其对脓毒症时胆碱能抗炎通路是否有辅助作用,并探讨其可能的分子机制。
1 材料与方法
1.1 主要试剂与仪器
CORM-2、卡巴胆碱、异硫氰酸荧光素标记的α-银环蛇毒素(FITC-α-BGT)购自美国 Sigma公司,TNF-α试剂盒、IL-6试剂盒购自美国 Biosource公司,550酶标仪购自美国Bio-Rad公司,TDL-40B台式低速离心机购自上海安亭科学仪器厂,高速低温台式离心机购自美国Beckman公司。……