转染CTGF基因对乳腺癌细胞MMP-2及TIMP-2表达的影响

2012-11-22许斌陈寅戴桂红蒋小芹王薇赵国军于鸿

江苏大学学报(医学版) 2012年2期

许斌，陈寅，戴桂红，蒋小芹，王薇，赵国军，于鸿

(泰州市人民医院1.普外科，2.病理科，江苏泰州225000)

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)是新发现的CCN家族成员，在人类多种组织器官中广泛表达，具有促进细胞增殖、介导细胞黏附、刺激细胞迁移、促进血管生成等生物学功能［1］。近年来的研究显示CTGF的表达水平与多种恶性肿瘤的发生进展、浸润转移、肿瘤血管生成及预后密切关联［2］。CTGF基因在恶性肿瘤中的作用已引起了越来越多研究者的重视，但目前对CTGF基因在乳腺癌发生、发展过程中的具体机制并不十分明了。本实验采用细胞转基因技术，将CTGF cDNA经脂质体介导转染人乳腺癌MCF-7细胞株，观察转基因细胞克隆基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2)的表达及该克隆细胞增殖的改变，以进一步探讨CTGF对乳腺癌的作用机制，为今后对乳腺癌患者实施针对性基因治疗提供理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料

人乳腺癌MCF-7细胞株购于中国科学院上海细胞生物研究所;DMEM、胎牛血清及无血清培养液购于Gibco BRL公司;OneStep RT-PCR Kit购于Qiagen公司;Trizol试剂及Lipofectamine 2000转染试剂盒购于Sigma公司;鼠抗人MMP-2单克隆抗体及鼠抗人TIMP-2单克隆抗体购于 Dako公司;羊抗人CTGF多克隆抗体及兔抗羊FITC-IgG购于Santa Cruz公司;ABC试剂盒购于Vector公司。PCR引物由上海英骏生物技术有限公司合成。