李元宏 常冰梅

1.山西医科大学，山西太原 030006；2.山西医科大学汾阳学院，山西汾阳 032200

RNA干扰survivin基因对宫颈癌细胞中survivin蛋白表达及caspase-3酶活性的影响

李元宏1，2常冰梅1

1.山西医科大学，山西太原 030006；2.山西医科大学汾阳学院，山西汾阳 032200

目的 观察RNA干扰survivin基因对宫颈癌细胞中survivin蛋白表达及caspase-3酶活性的影响。 方法 针对survivin mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA（siRNA）的DNA模板，构建shRNA重组质粒，转染Hela细胞，筛选获得转染效率最高的阳性克隆，阴性对照为阳性克隆随机打乱序列。Western blot方法检测survivin蛋白表达，分光光度法检测caspase-3酶活性。 结果 干扰48 h时，siRNA-168载体干预组干预效果最好，siRNA阳性质粒干扰组（实验组）survivin蛋白表达量为阴性对照组中survivin蛋白表达量的13%，是空白组survivin蛋白表达量的16%。干扰后caspase-3活性表达升高，实验组与阴性对照组、实验组与空白组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论 siRNA可有效抑制Hela细胞survivin蛋白表达，升高caspase-3酶活性。

survivin基因；宫颈癌细胞；survivin蛋白；caspase-3

宫颈癌是女性近年来常见的恶性肿瘤之一，是由人类乳头瘤病毒（HPV）引起，在全世界，发展中国家宫颈癌发病率较高，我国每年新增病例13万以上[1]，每年有20多万名女性死于该病。survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员，具有肿瘤特异性，表达于肿瘤组织[2]。RNA干扰是与靶基因同源的双链RNA诱导的特异转录后基因沉默现象，其作用机制是双链RNA被特异的核酸酶降解，产生干扰小RNA（siRNA），这些siRNA与同源的靶RNA互补结合，特异性酶会降解靶RNA[3]，该技术已经发展成为基因治疗、基因结构功能研究的常用技术。本研究拟采用RNA干扰技……