陈立思， 闻真珍, 蔡继业, 曾伟达， 刘运权, 王 曼， 刘 伟*

(1.华南农业大学生命科学学院，广东广州 510642； 2.广州花卉研究中心，广东广州 510360)

4种兜兰RubisCO的分离纯化及酶学性质初步研究

陈立思1，2， 闻真珍1, 蔡继业1, 曾伟达2， 刘运权1, 王 曼1， 刘 伟1*

(1.华南农业大学生命科学学院，广东广州 510642； 2.广州花卉研究中心，广东广州 510360)

采用硫酸铵沉淀、阴离子交换层析与凝胶过滤层析的方法，分离纯化得到硬叶(Paphiopedilummicranthum)、紫纹(P.purpurattum)、带叶(P.hirsutissimum)和亨利(P.henryanum)4种兜兰RubisCO的大、小亚基，相对分子量分别为51.5×103～54.5×103和15.0×103～16.0×103. 4种兜兰RubisCO的羧化/加氧活性在pH8.0、温度30 ℃时最高，其活性大小顺序为硬叶兜兰>紫纹兜兰>亨利兜兰>带叶兜兰，且紫纹兜兰、亨利兜兰的羧化/加氧活性比值相对高于硬叶兜兰、带叶兜兰；硬叶兜兰RubisCO的Km(RuBP)值最小.4种兜兰RubisCO的特性反映了其不同的生理和生境特征.

兜兰(Paphiopedilum); RubisCO; 分离纯化; 酶学性质

核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶( E.C.4.1.1.39)(简称RubisCO)存在于叶绿体基质中，是所有光合生物进行光合碳同化的关键性酶[1].目前，已经从多种植物中分离纯化了RubisCO，但有关兜兰RubisCO的研究却未见报道.兜兰属(Paphiopedilum)是兰科(Orchidaceae)植物中最具特色的一个类群，得名于其呈兜状的唇瓣，具有较高的观赏和研究价值.由于野生兜兰受到掠夺性采挖和贸易，导致数量急剧减少甚至灭绝.对野生兜兰进行有效保护是一个亟待解决的问题，而对其光合作用关键酶RubisCO的研究可为研究其光合作用特性提供基础，并能为其保护和栽培提供理论支持.

不同兜兰对光照的要求不同，其光合作用特性也不同.本论文从……