温 海 秦海斌 张汇东 贺星亮

LAMP方法快速诊断犬瘟热感染一例

温 海 秦海斌 张汇东 贺星亮

犬瘟热是由犬瘟热病毒（Distemper virus，CDV）引起的犬科、猫科、鼬科、浣熊科等动物的一种急性、高度接触性传染病，可导致犬50%～100%的发病率和60%～90%病死率，康复犬典型后遗症是犬嗅觉功能下降或丧失。我国1972年首次报道本病在犬流行，并陆续在貉、貂、狐、大小熊猫、猴等动物中发现本病。自20世纪80年代以来，随着我国警、军犬工作的发展及伴侣动物的增多，使人们对本病及病原有了高度的重视。

近几年，众多非典型犬瘟热临床病例的出现使得犬瘟热临床症状越来越复杂，仅根据流行病学、临床症状、包涵体检查和病毒分离等常规方法很难确诊CDV感染，国内外许多学者对CDV诊断进行了大量研究，建立了RTPCR、巢式PCR、套式PCR、原位杂交、原位杂交与RT-PCR结合等多种分子生物学检测方法，这些分子生物学技术从CDV的 RNA入手，通过基因水平来鉴定病毒的存在，具有高度的敏感性、特异性、可信度高等优点，但其反应扩增过程、结果判断环节上均要求具备先进的仪器设备，因而在临床检测中的应用受到限制，因此，让这些技术走出实验室、满足兽医临床应用一直是相关研究的焦点。

2000年，日本Eiken化工有限公司Notomi T等开发了一种新的核酸扩增技术—环介导的等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP），在恒温条件（约60℃～65℃）下通过一步反应既能完成靶基因的扩增，若在反应产物中加入一种荧光染料，通过反应产物的颜色变化即可判断是否出现了目的基因的扩增，这些特点使该技术减少了对先进仪器的依赖；……