赵金伟，李 韬，马 震，董 强，王钟林＊

（1.吉林省人民医院 急 诊外科；2.吉林大学白求恩医学院09级，吉林 长 春130021）

几项有关粪便基因mRNA检测技术在结直肠癌诊断中的研究报告表明，采用RT－PCR技术检测结直肠癌病人粪便基因的异常表达对结直肠癌诊断率较高，但关于CD44、COX－2、CK－20m RNA在病灶及粪便中表达是否具有同源性，能否作为CRC的诊断标记物有待于研究。

本实验的目的是通过对COX－2，CK－20，CD44v6m RNA在结直肠原发灶及病人粪便中的表达，证实粪便中COX－2，CK－20，CD44v6mRNA表达来源于原发灶肿瘤细胞的脱落所致，为临床结直肠癌筛查选择合适的多基因标记物联合检测指标。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床资料 收集吉林省人民医院及吉林省肿瘤医院2008年1月－2010年2月行结直肠癌根治术的结直肠癌原发灶38例，所有患者术前均未行抗肿瘤治疗，其中，男性20例，女性18例，年龄42－81岁，平均年龄62岁，Duke＇s A、B期13例，Duke＇s C、D期25例。分化程度：高中分化15例，未、低分化23例。患者术前2－3天在医生指导下用带盖粪便标本盒收集粪便标本，在2小时内送于实验室，分装后－80℃保存，对术中切除的病变标本切取一部分置于标本盒内，置于－80℃冰箱中保存备用。粪便标本均为服药前或灌肠前留取标本。

1.1.2 粪便标本的预处理 粪便标本解冻后，取成形粪便标本3－5克或水样便100毫升加入100毫升液基细胞保存液100毫升搅拌均匀后，依次经过100目筛网，200目筛网，1200转／分（rpm）离心10min后弃去上清液，加提取液重悬沉淀至50毫升，过300目筛网，1200转／分（rpm）离心10min后弃去上清液，取沉淀加入液基细胞保存液1.5毫升置于1.5ml Eppendorf管中，上述标本处理1小时完成，并置于－80℃冰箱中保存。……