亢春彦，陈 洁，肖 红，汤少鹏，薛玉仙，张秀芝，吕丰收

（1.河南职工医学院病理学教研室，河南 郑 州451191；2.河南省胸科医院胸外科，河南 郑 州450003）

TSLC1（tumor suppressor in lung cancer 1）基因，是正常人体组织广泛表达的免疫球蛋白样细胞黏附分子［1］。已证实TSLC1启动子区甲基化在多种肿瘤中是一个频发事件，与TSLC1的表达下调呈相关性［2－4］。

本研究采用甲基化特异性的聚合酶链技术（Methylation specific PCR，MSP），检测了人原发性肺癌组织、肺良性病变组织、癌旁组织及支气管鳞状化生组织中TSLC1基因启动子区CpG岛甲基化状况，观察TSLC1基因在不同肺组织中的甲基化状态，探讨其与肺癌发生发展之间的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集 收集53例肺癌手术切除标本，24例肺良性病变组织，15例癌旁组织和11例支气管鳞状化生镜检组织。标本取自河南省胸科医院。入组条件：（1）患者均经过病理确诊（2）患者未经任何放、化疗（3）无其他肿瘤病史。肺癌组：鳞癌31例、腺癌16例、小细胞癌6例。肺良性病变组：肺结核9例，肺炎8例，炎性假瘤4例，肺脓肿2例，间质性肺病1例。标本于术后或镜检后半小时内获得，－70℃冰箱保存。

1.2 DNA的提取 采用DNA纯化试剂盒（上海生物工程有限公司）提取组织基因组DNA，操作步骤按说明书进行。

1.3 DNA的修饰 采用DNA修饰试剂盒（Chemicon公司）亚硫酸氢盐修饰基因组DNA，修饰后的DNA通过乙醇沉淀回收并重悬于去离子水中，用于甲基化特异性PCR。

1.4 寡核苷酸引物 设计合成2种引物：甲基化特异的引物（TSLC1－M），上游引物5’＇－TTTTAATTATTTTCGAGTTTATCG；下游引物5’－TCTT－TAAAAACGAAAACTATACG。非甲基化特异的引物 （TSLC1－U），上 游 引 物 5’－TTTTTAATTATTTTTGAGTTTATTG；下 游 引 物 5’－AATCTTTAAAAACAAAAACTATAC。2种引物扩增片断长度均为109 bp。

1.5 PCR扩增……