王远涛，王伟刚，王 钢，周洪澜，高宝山，安 伟

（吉林大学白求恩第一医院 泌 尿系统疾病诊治中心，吉林 长 春130021）

NKT（Nature killer T cells）细胞是一种具有NK细胞特点的T细胞。它是一种独特的细胞亚群，兼有NK细胞和T细胞两种性质［1－3］。NKT细胞活化后能迅速分泌大量的IFN－γ和IL－4［4］。因此，NKT细胞在机体免疫自稳、抗感染和抗肿瘤以及移植免疫等诸多方面发挥重要作用。但其在诱导免疫耐受过程中的具体作用，仍不十分清楚。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 选取BALB／c小鼠作为供者，C57BL／6小鼠作为受者，约6－8周龄，体重15－20 g，所有试验小鼠均为雌性且购于吉林大学第一医院动物实验中心。

1.1.2 手术器械及试剂 单人双目手术显微镜一台购于深圳瑞沃德公司；显微外科手术器械若干，购自德国ROBOZ公司；鼠NKT isolation kit购自BD公司；IL－10、IFN－γELISA 检测试剂盒购自 BD 公司；10－0血管缝合线购自美国Ethicon；6－0医用丝线购自上海医用缝合厂；4%水合氯醛由吉林大学基础医学院提供；CD40L抗体购自ABCAM。MLR缓冲液及MACS缓冲液由吉林大学第一医院泌尿系统疾病诊治中心研究室配置。

1.2 方法

1.2.1 供体手术 供体采用4%水合氯醛（10μl／g）腹腔注射麻醉。经下腔静脉静推注1%的肝素盐水0.3 m L，使供体小鼠全身肝素化。沿胸骨中线剪开胸骨颈部，充分暴露心脏并迅速喷洒冰盐水降温。迅速结扎下腔静脉。充分游离肺动脉及主动脉并剪断，其余血管及组织于近心脏侧集束结扎并切断。取下供心，置于4℃生理盐水中保存备用。

1.2.2 受体手术 小鼠麻醉满意后，固定于鼠板上。腹部经正中切口单层进腹，游离下腔静脉及腹主动脉周围结缔组织，血管夹同时阻断下腔静脉及腹主动脉，供心主动脉和受体腹主动脉行端侧吻合，供心肺动脉和下腔静脉行端侧吻合，单层连续缝合关闭腹腔。……