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新疆伽师瓜采后贮藏中病原菌的筛选与初步鉴定

2012-11-02王坚单春会童军茂唐凤仙谢龙

石河子大学学报(自然科学版) 2012年4期

王坚,单春会,童军茂,唐凤仙,谢龙

(石河子大学食品学院,石河子832003)

伽师瓜是新疆特色资源,深受消费者青睐[1],但致腐病原菌作为影响伽师瓜贮藏品质的主要因素正受到人们日益关注[2]。采后伽师瓜腐烂的主要病原菌的确定可以为采用生物防治及其它方法更有效地抑制新疆伽师瓜的腐败变质,延长伽师瓜的贮藏保鲜期,提高伽师瓜的经济价值提供参考依据和理论指导。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1原料

伽师瓜采摘于新疆阿勒泰地区。

1.1.2试剂与仪器

主要试剂:氢氧化钠(分析纯),过氧化氢,乳酸-石碳酸棉蓝染色试剂等。

主要仪器设备:数显不锈钢电热培养箱,生化培养箱,显微镜,电热恒温干燥箱,冰箱,移液器,紫外可见分光光度计,超净工作台等。

1.2 方法

1.2.1培养基

采用PDA培养基[3]:马铃薯200g,葡萄糖20 g,琼脂15~20g,蒸馏水1000mL,自然pH,121℃,灭菌20min。

1.2.2病原菌的分离纯化

参照文献[4]选取。伽师瓜腐烂组织。在无菌条件下,切取约1cm3的腐烂果肉,放入装有浓度为0.85%的生理盐水中,于常温下进行摇床处理使微生物细胞分散均匀。用无菌移液器吸取菌悬液制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8等一系列样品稀释液[5]。

用无菌移液器吸取0.1mL不同稀释浓度的菌悬液接种在培养基中,每个稀释度设3个重复。待长出菌落后,进行划线分离,直至获得特性稳定的单菌落。根据形态进行初步分类、编号。

1.2.3主要致病菌的确定

于无菌操作间,将新鲜新疆伽师瓜用打孔器在伽师瓜腰部对称打出若干小孔。在打孔处分别接入浓度为10-5、10-6、10-7所筛选的病原菌孢子悬浮液。……

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